首都医科大学学报 ›› 1988, Vol. 9 ›› Issue (4): 295-295.

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氯霉素对大肠杆菌质粒的扩增作用

张海峰1, 张澄波2, 马大龙3   

  1. 1. 北京医学专科学校生化教研室;2. 首都医学院细胞生物学研究室;3. 北京医科大学免疫学教研室
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1988-10-15 发布日期:1988-10-15

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1988-10-15 Published:1988-10-15

摘要: 为适应国内实验条件,我们在固相条件下用氯霉素扩增质粒却获得成功。所培养的大肠杆菌为K12,为作者们从人肝细胞cDNA文库中筛选出的人清蛋白阳性克隆HSA6,含pEX表达质粒及清蛋白cDNA插入片段,培养温度30℃。所用氯霉素为东北制药总厂生产。本方法的主要关键是让氯霉素从下层琼脂中缓慢扩散入上层生长大肠杆菌的琼脂中,从而使质粒扩增。具体方法是制备两种琼脂平皿,甲平皿琼脂底层填有一张灭菌滤纸,以便于转移琼脂。