目的 制备帕金森病相关蛋白PINK1抗血清并检测其在大鼠脑组织中的表达特征。 方法 制备人PINK1基因重组蛋白,免疫新西兰大耳白兔获得抗PINK1抗血清;通过盐析法初步纯化、Western blotting法鉴定抗血清的敏感性和特异性、免疫组化法检测PINK1在大鼠脑中的分布。结果 人PINK1基因重组蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达;纯化蛋白制备兔抗血清经盐析纯化后,兔抗人PINK1抗血清特异性识别人PINK1基因重组蛋白及大鼠脑匀浆中40 000和66 000的蛋白质,与预期结果一致;免疫组化染色显示PINK1广泛分布在嗅球、皮质、海马、纹状体、小脑、黑质和红核。结论 制备了一种兔抗人PINK1多克隆抗血清;PINK1广泛分布于大鼠中枢神经系统;为以后深入研究PINK1表达的组织分布、细胞内定位及其生物学功能提供了有效地实验工具。
目的 研究山萘酚(kaempferol,KF)与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)相互作用的特征。方法 应用荧光光谱法检测KF对BSA内源性荧光的猝灭作用,应用校正的Stern-Volmer方程计算动态荧光猝灭常数和静态猝灭常数,应用荧光猝灭双对数方程计算KF与BSA之间的结合位点数,并且根据热力学参数,推断结合反应的主要作用力类型,在此基础上根据Forster的偶极-偶极非辐射能量转移理论计算KF与BSA结合时供体-受体之间的结合距离和能量转移效率。结果 KF对BSA荧光猝灭机制为静态猝灭和动态猝灭的复合方式,结合常数KA在108数量级,结合位点数接近2,结合距离r=1.45 nm,能量转移效率E=0.73,作用力类型为疏水作用。结论 KF可通过动态和静态猝灭结合的机制对BSA的内源性荧光产生明显的猝灭作用,两者之间的结合力为疏水作用。
目的 以Eμ-BCL10转基因(transgenic,Tg)小鼠为模型研究BCL10高表达引起MALT淋巴瘤发病的分子机制。方法 PCR鉴定Eμ-BCL10转基因小鼠,Western blotting检测BCL10转基因蛋白的表达,组织学方法显示BCL10 Tg小鼠脾脏MALT淋巴瘤的前体细胞-边缘带(marginal zone,MZ)B细胞扩增,流式细胞仪鉴定脾脏边缘带B细胞并分离出这群B细胞用于抗凋亡机制的研究,使用Annexin V-FITC/ PI双染法经流式细胞仪检测边缘带B细胞凋亡情况。结果 PCR鉴定BCL10转基因阳性(Tg/+)小鼠, Western blotting证明内源性BCL10蛋白在Tg/+和非转基因野生型(wide type,WT)小鼠中表达的水平相同;BCL10 Tg/+小鼠BCL10蛋白的表达量是WT小鼠的2倍。组织学染色显示,BCL10 Tg/+小鼠脾脏增生的B细胞可能是边缘带B细胞,将这群B细胞用CD21、CD23染色并经流式细胞仪分析,证明这群增生的B细胞正是CD21high/CD23low的边缘带B 细胞。为了进一步研究边缘带B细胞的增生机制,采用CD43、CD23双染,然后通过流式细胞仪分选出BCL10 Tg/+以及WT小鼠的边缘带B细胞。BCL10 Tg/+小鼠的边缘带B细胞群约30%可以在含5% FBS的RPMI1640中存活1周以上,而WT小鼠的边缘带B细胞群在第3天几乎全部死亡(P<0.01),这一结果说明,BCL10的高表达引起边缘带B细胞的抗凋亡效应。Anti-IgM诱导边缘带B细胞凋亡实验结果显示,BCL10高表达保护anti-IgM诱导的细胞凋亡。结论 BCL10高表达引起脾脏边缘带B细胞扩增,扩增的B细胞具有抗凋亡特性,这种抗凋亡特性影响抗原受体信号传导途径。这些结果可以在一定程度上解释因BCL10高表达而引起的MALT淋巴瘤的发病分子机制。
目的 检测SARS冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白的功能性受体血管紧张素转换酶2(ACE2)在小鼠胰腺内、外分泌腺的表达。方法 ① RT-PCR:麻醉小鼠后取胰腺和肺组织,采用RTPCR方法检测各组织ACE2的表达。② 免疫电镜:麻醉小鼠后取胰尾,采用免疫电镜方法检测胰腺组织ACE2的表达。结果 胰腺和肺脏组织均表达ACE2 mRNA,且胰腺内、外分泌腺均表达ACE2。结论 ACE2在小鼠胰腺内、外分泌腺的表达可介导SARS-CoV侵入并损害胰腺,使胰岛素耗竭。
目的 为了使我国的言语测听临床工作与国际听力研究接轨,研制一套适应我国耳病患者的汉语语言训听系统。方法 作者利用Visual Studio 2008、Access 2003、DirectX9开发了汉语言语测听系统,系统包括受试者管理、言语测听、测试表管理、数据管理、系统设置5个功能模块。结果 本测听系统受试者管理模块可以添加、修改、删除、检索、导出患者的各项信息;言语测听模块可以进行言语识别阈和识别率的测听,测试完毕系统可以自动存储分析受试者的测听结果,并绘制出受试者的PI曲线;测试表管理模块可以查看、添加、修改、删除测试表及测试项的文字、关键字、声音;数据管理模块可以查看、筛选、导出受试者的测试结果;系统设置模块中,用户可以设置测试表的选择方式、播放方式、自动播放时间间隔、刺激声及噪声。结论 本系统改变了传统的手工测听模式,简便了言语测听工作,缩短了测试时间,降低了测试成本,可以为我国的言语测听提供一个统一的平台,进一步促进言语测听的科学化、标准化、信息化。
目的 探讨缺血/再灌注大鼠脑和血浆中α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)含量的变化。方法 将30只雄性Wistar大鼠用随机数字表法分成假手术对照组(10只)和缺血/再灌注组(20只)。用线栓法制作大脑中动脉梗阻(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血1.5 h后,再恢复灌注24 h;用Western blotting法和ELISA法检测大脑缺血半暗带、梗死核心区和血浆中α-Syn的含量变化。结果 缺血半暗带α-Syn表达量显著增加,而梗死核心区和血浆中α-Syn无显著性变化。结论 缺血/再灌注可增加缺血半暗带中α-Syn的含量。
目的 探讨在分层抽样横断面调查研究资料中多水平模型相对于传统模型的优越性。方法 分别采用普通logistic回归模型和多水平logistic回归模型分析“第2次全国人体重要寄生虫病现状调查”中的华支睾吸虫病流行区调查中的广东省数据。结果 在传统logistic回归分析中差异无统计学意义的年龄组,在多水平logistic回归分析中差异有统计学意义。结论 与传统logistic回归模型相比,多水平模型在处理层次结构的数据时考虑到数据误差的层次性,可以有效地分析具有层次结构的数据。
目的 研究某医科大学学生心理压力产生的主要原因及相关影响因素,为学校的学生心理健康教育提供参考,从而预防学生自杀的发生。方法 采用整群抽样,用自制问卷调查大学生自杀意念及相关信息,并用SPSS 15.0统计软件分析数据。结果 自杀意念的总检出率为11.62%,无性别差异。反映心理压力的5项原因从高到低排列为:前途压力、经济压力、家庭成员和人际关系压力、适应压力、学习与个人能力压力。个体特征中单亲家庭和身体残疾是产生心理压力的重要影响因素。结论 对医科大学学生进行心理压力疏导时,应优先考虑就业和经济方面的因素,同时针对不同个体特征要有所侧重。
目的 比较基因工程重组抗原与传统疫苗的免疫原性;探讨同一载体表达不同抗原的能力和抗原间的相互作用。方法 将编码甲型肝炎病毒Vp1 aa24-171和戊型肝炎病毒ORF2 aa431-615的重组表达质粒pBV220-EAAg342及pBV220-AEAg342转化入大肠杆菌BL-21,筛选出高效表达的菌种进行目的蛋白的表达。用DEAE-sepharose FF和CM-sepharose FF离子层析交换柱纯化表达重组蛋白,采用SDS-PAGE、Western blotting方法进行分析鉴定。用纯化的重组蛋白及传统甲肝疫苗灭活疫苗与减毒活疫苗免疫小鼠,比较特异性抗体的产生水平。结果 表达的重组蛋白相对分子质量约为36 000,表达量约占菌体总量的25%;且重组嵌合抗原EAAg342可以形成直径10~20 nm的类病毒(virus-like particles,VLP)颗粒。Western blotting证实2种重组蛋白均能分别与甲型肝炎和戊型肝炎患者阳性血清发生特异性反应。免疫小鼠后可诱导产生高滴度的抗戊肝特异性抗体;而抗甲肝特异性抗体水平与传统甲肝疫苗相比较低。结论 使用原核系统表达的甲/戊肝重组抗原能够高效表达,2种不同的融合蛋白均分别具有良好的抗原性和免疫原性,具有开发双价疫苗及同时诊断甲型戊型肝炎试剂盒的前景。
目的 了解贵阳市甲型副伤寒沙门菌的分子流行病学特征,分析菌株的相似性,为追踪传染来源、查找传播途径提供线索。方法 用脉冲电场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)方法进行分型。结果 根据细菌染色体DNA的Spe I酶切图谱,将贵阳地区146株甲型副伤寒沙门菌分成10个PFGE带型,1型32株占21.9%,2型73株占50.0%,3型13株占8.9%,4型7株占4.8%,5型14株占9.6%,6型、7型、8型和9型各1株,各占0.7%,10型3株占2.7%,各型之间的相似性在98.1%~72.0%。暴发株24株被分为5个PFGE带型,1型占54.2%,带菌者1株为1型。各年菌株的PFGE带型不尽相同,1型和2型为常年流行带型。高流行区县的甲型副伤寒菌株被分为9个PFGE带型。结论 贵阳地区甲型副伤寒沙门菌流行复杂以2型和1型为优势流行带型,提示存在同一克隆群的菌株广泛传播。该研究进一步证实PFGE是一种发现或预警暴发的可行服务手段。
目的 探讨住院肝硬化患者的临床和生存情况,分析影响其预后的危险因素。 方法 选取337例肝硬化住院病例,对临床资料进行收集与统计,并随访预后情况,分析临床及实验室相关指标与预后的关系。结果 ① 血清总胆红素、直接胆红素、血肌酐、尿素氮、凝血酶原时间、凝血酶原时间国际标准化比率、血红蛋白、白蛋白、腹水与住院期间预后显著相关。② 血清总胆红素、直接胆红素、肌酐、尿素氮、凝血酶原时间、凝血酶原时间国际标准化比率、白蛋白、低密度脂蛋白、胆固醇、血钠、肝性脑病、肝肾综合征、腹水及年龄与5年预后显著相关。③ 经多因素COX回归分析筛选出8个与5年转归相关的独立影响因素为血清白蛋白、肌酐、尿素氮、总胆红素、凝血酶原时间、低密度脂蛋白和腹水、年龄。④ 住院期间生存率为89.0%,3个月生存率87.8%,6个月生存率82.2%,1年生存率77.4%,3年生存率59.1%,5年生存率46.9%。结论 ① 较多常用临床指标与肝硬化预后相关,肝功能是决定预后的主要因素。② 腹水及年龄亦与5年病死率显著相关。
目的 分析比较3种常用开放式腹股沟疝无张力修补术(Lichtenstein术式、Rutkow术式、腹膜前修补术式)的临床疗效。方法 本文将2003年2月至2009年8月在首都医科大学附属北京同仁医院普外科诊断患腹股沟疝的共1 136例住院患者,根据患者当时采用的开放式腹股沟疝无张力修补术术式的不同分为3类:即Lichtenstein术式、Rutkow术式、腹膜前修补术式。对比分析这3种腹股沟疝无张力修补术在住院时间、住院费用、术后并发症、复发率和术后疼痛等方面的差异。结果 开放式腹股沟疝修补术1 136例均成功实施手术。3种手术类型间Lichtenstein组平均住院费用显著低于Rutkow组和腹膜前修补组;术后并发症未见到,组间差异无统计学意义。住院时间、复发率和术后疼痛组间差异均无统计学意义。结论 3种腹股沟疝无张力修补术均是治疗腹股沟疝安全、有效的手术方法,均有微创、住院时间短、复发率低和术后疼痛轻、术后并发症少的优点,个体化治疗仍是最佳选择。严重的早期术后疼痛预示着持续的慢性腹股沟痛发生的可能性。
目的 探讨可膨胀髓内钉在股骨转子间骨折治疗中临床疗效及意义。方法 本研究取自2006年6月至2009年12月到首都医科大学附属北京同仁医院骨科就诊的47例股骨转子间骨折病人,男性20例,女性27例,年龄68~91岁。稳定型骨折(A1.1~A1.3)18例,不稳定型骨折(A2.1~A3.3)29例。对这47例病人应用Fixion PF型可膨胀髓内钉进行治疗。结果 病人伤口全部在Ⅰ期愈合。手术时间为45~110 min,平均68 min。术中出血量70~300 mL,平均136 mL。47例患者全部获得随访,随访时间8~26周,平均14周。骨折平均愈合时间10周。结论 可膨胀髓内钉在老年性股骨转子间骨折的治疗中具有诸多优点:手术操作简便,创伤小,手术时间短;X线下暴露时间大大减少,减少了医生和患者的放射损害;膨胀栓钉挤压松质骨,降低了内固定物对骨质的切割;骨折愈合快。可膨胀髓内钉治疗股骨转子周围骨折值得临床合理推广使用。
目的 探讨他莫西芬对绝经后妇女子宫内膜腺细胞PTEN表达的影响,从分子生物学上研究绝经后乳腺癌术后妇女应用他莫西芬有否引起子宫内膜癌的可能。 方法 应用免疫组织化学LSAB二步法,检测PTEN在绝经后妇女服用2年他莫西芬后子宫内膜中及绝经后子宫内膜腺癌中的表达,以脱垂子宫的子宫内膜为对照。 结果 他莫西芬组与对照脱垂组、子宫内膜腺癌组与对照脱垂组之间差异具有统计学意义(P<0.01);他莫西芬组与子宫内膜癌组之间差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 绝经后每日服用他莫西芬40 mg延续2年以上的患者,由于他莫西芬对低雌激素水平的子宫内膜起到弱雌激素样作用,导致子宫内膜腺细胞中PTEN存在严重减少或缺失,可能是他莫西芬导致子宫内膜癌的早期的分子学水平的重要事件。
目的 探讨妊娠合并风湿性心脏病的有效治疗手段。方法 收集首都医科大学附属北京安贞医院妇产科就诊于2002年1月至2009年1月期间的妊娠合并风湿性心脏病的25例患者的临床资料,对其进行回顾性分析。根据心脏病病种的治疗方式、心功能分级、产科检查情况进行分组分析。结果 妊娠合并风湿性心脏病的发病率为0.49%。内科药物治疗14例,新生儿死亡1例。心脏手术治疗11例,其中孕前行瓣膜置换术5例,孕期行经皮二尖瓣球囊扩张术6例。结论 妊娠合并风湿性心脏病严重危害母儿健康。心脏手术有效治疗妊娠合并风湿性心脏病。对比孕前行瓣膜置换术、孕期行经皮二尖瓣球囊扩张术对母儿预后的改善差异无统计学意义。
目的 根据易学的象数关系理论探讨《伤寒论》中用药与功效的关系。方法 采用《伤寒论》原文中的剂量用数和后人对每个药物在不同方中功效的分析,应用Logistic回归、配对卡方检验等统计方法进行量与效关系的研究。结果 药物剂量用数与汗、吐、下、和、温、消、清、补8种功效虽有相关,但不能用数来完全解释功效。结论 探讨出一种研究《伤寒论》用药规律的方法,为后续研究提供思路。
目的 本研究旨在深入了解淀粉样变性病患者多系统受累的临床特点,提高对AL型淀粉样变性病的认识。 方法 研究对象为1999年1月至2009年1月在北京监狱管理局中心医院及北京大学第一医院确诊的20例AL型肾淀粉样变性病患者,所有患者均经过活检病理检查刚果红染色阳性确诊(舌、皮肤、肾、直肠黏膜)淀粉样变性病,经免疫荧光或免疫组化确定为AL型。对其临床表现及实验室检查资料进行了回顾性分析。 结果 1)90%患者发病年龄>40岁,男女比例3∶2。90%的患者有2个或以上系统受累,3个系统以上受累占30%(6/20)。一般表现乏力者占45%(9/20),体质量下降者占40%(8/20)。2)循环系统呈现低血压趋势;超声心动图检查左室壁厚度(1.12±0.34)cm,室间隔厚度或左室壁厚度>1.1 cm者占35%(7/20),40%(8/20)患者有左室舒张功能受损表现,15%(3/20)患者发现颗粒样心肌回声增强。心电图异常者占80%(16/20)。3)消化系统症状达75%;消化道出血者占30%(6/20);舌体肥大者占25%(5/20);肝脏肿大者占35%(7/20)。4)肾脏病变: 90%(18/20)的患者表现为肾病综合征;85%(17/20)患者有肾小管损伤;肾脏增大者(长径>12 cm)占40%(8/20)。5)血液系统病变:85%(17/20)患者血和尿中免疫固定电泳(immunofixation electrophoresis,IFE)发现同类型的单克隆免疫球蛋白轻链,其中λ轻链15例,κ轻链2例。6)神经系统病变:25%(5/20)患者出现神经系统表现。 结论 AL型淀粉样变性病临床呈多系统受累,消化器官、肾脏、心脏为常见的靶器官,本病临床表现复杂但有临床特点可循。
目的 探讨颈脊髓受压型疾病的手术治疗方法。方法 对北京市延庆县医院骨科自2003年8月至2008年11月收治的30例颈脊髓受压型病人及北京积水潭医院脊柱外科2008年12月至2009年9月收治的35例颈脊髓受压型患者行不同术式的手术治疗:颈前路减压30例,颈后路减压30例,前后路一期联合手术5例。按JOA评价临床疗效。结果 65例患者均得到9个月至5年门诊或电话随访,均获得满意疗效。结论 伴有发育性颈椎管狭窄者、颈椎后纵韧带骨化症(ossification of posterior longitudinal ligament,OPLL)者、退变性椎管狭窄者,选择颈后路椎管扩大成形术;1~2个椎间盘突出者选择颈前路减压植骨融合钛板内固定术或行颈椎人工间盘置换术;椎管狭窄合并椎间盘突出较大脊髓前后受压者,可选择一期前后路联合手术。
黄陵,女,汉族,1916年3月出生,广东省番禺人。1942年毕业于北京医学院(现北京大学医学部),留校任助教。1946年10月至1948年9月,在沈阳医学院病理解剖学教研室任讲师。1948年10月至1960年5月,在北京医学院病理解剖学教研室任讲师、副教授、副主任。1960年由北京医学院调入北京第二医学院(现首都医科大学),着手组建了病理解剖教研组并任教授、主任,1956年加入九三学社,1984年加入中国共产党。曾任中华病理学学会北京分会主任,全国病理学会常任委员等职。