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当期目录

    2011年 第32卷 第3期    刊出日期:2011-06-21
    国内期刊文摘
    2011年12月 第32卷 第3期目 次
    2011, 32(3):  0-0. 
    摘要 ( 268 )   PDF (1203KB) ( 182 )  
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    学系简介
    传染病学系简介
    2011, 32(3):  0-0. 
    摘要 ( 189 )   PDF (301KB) ( 123 )  
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    其他
    投稿须知
    2011, 32(3):  0-0. 
    摘要 ( 180 )   PDF (237KB) ( 109 )  
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    传染病及相关慢性疾病研究进展
    原发性肝细胞癌中乙型肝炎病毒基因整合的突变分析
    张婷;许强;杨紫伟;蒋素贞;鲁凤民;陈香梅;庄辉
    2011, 32(3):  313-317. 
    摘要 ( 1392 )   PDF (1018KB) ( 246 )  
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    目的 探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)整合序列中基本核心区突变与乙肝病毒相关肝癌发生的相关性。
    方法 应用Alu-PCR和基于接头的LMPCR方法扩增40对乙肝相关性肝癌组织和配对癌旁组织中整合的HBV序列,PCR产物纯化后以ABI公司3700测序仪进行全自动测序,测序结果使用Pub Med BLAST软件和Bio Edit软件进行分析。
    结果 65.0%的肝癌组织检测到整合HBV病毒序列(26/40),共检出37个不同的HBV整合序列。67.5%的癌旁组织中检测到整合HBV病毒(27/40),共检出68个不同的整合序列。平均每例肝癌组织中HBV整合序列检出数为1.42个,而癌旁组织为2.52个,癌组织低于癌旁组织。整合HBV序列发生A1762T/G1764A双突变在肝癌中的检出率高于癌旁组织,差异无统计学意义。
    结论 HBV感染相关肝癌组织及癌旁组织中都检测到整合HBV序列,再次表明整合是肝癌发生中的一个早期事件;而肝癌组织中整合HBV序列有更高的A1762T/G1764A突变检出率,从一个新的侧面表明这些突变在病毒的致癌过程中具有重要作用。
    HBV相关分泌蛋白c18orf54的克隆表达及初步功能研究
    常路丝;乔雍;魏洪莲;肖凡;郝晓花;张仁雯;成军;魏红山
    2011, 32(3):  318-323. 
    摘要 ( 1090 )   PDF (519KB) ( 320 )  
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    目的 体外原核表达C18ORF54的重组蛋白,对其进行纯化,制备兔抗C18ORF54蛋白多克隆抗体,并对该重组蛋白对HepG2细胞可能的生物学作用进行初步研究。
    方法 应用反转录聚合酶链反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术,以HepG2细胞总RNA为模板,反转录并扩增c18orf54目的基因片段,构建原核表达载体pET-32a(+)-c18orf54。转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基β-D-硫代吡喃半乳糖(isopropyl β D thiogalacttpy ranoside,IPTG)诱导并通过十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium lauryl sulfatepolyacrylamide gol electrophoresis,SDS-PAGE)分析、免疫印迹(Western blotting)、生物质谱技术分析证实c18orf54Z重组蛋白表达正确。用Ni+亲和柱纯化表达蛋白。C18ORF54重组蛋白免疫新西兰兔,获得抗c18orf54蛋白的多克隆抗体。以纯化的C18ORF54蛋白为抗原,分别以免疫前后的新西兰兔血清作为第一抗体,利用Western blotting和酶联免疫吸附(enzyine linked immunosorbent assay,ELISA)法对多克隆抗体进行特异性分析及效价检测。将不同浓度范围的C18ORF54重组蛋白与培养的HepG2细胞共孵育,初步了解该重组蛋白对HepG2细胞可能的生物学作用。
    结果 PCR法扩增获得c18orf54基因片段,成功表达了C18ORF54重组蛋白,经SDSPAGE和Western blotting分析得到证实。成功获得重组蛋白及抗C18ORF54多克隆抗体。ELISA检测证实多克隆抗体效价>1∶320 000。
    结论 利用大肠埃希菌BL21(DE3)能够成功表达C18ORF54蛋白,获得高特异性、高效价兔抗C18ORF54重组蛋白的多克隆抗体,为今后研究C18ORF54蛋白的生物学特性奠定了基础。
    慢性HBV感染患者bcp/pc区点突变模式、pres区缺失及其临床意义
    张鑫#;武彦宁#;张大可;董培玲;范春蕾;李磊;丁惠国
    2011, 32(3):  324-330. 
    摘要 ( 1584 )   PDF (511KB) ( 267 )  
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    目的 阐明HBV(hepatitis B virus,HBV)感染患者不同临床阶段bcp/pc(basic core promoter, BCP/precore,PC) 点突变模式及pres区缺失突变规律,并探讨其临床意义。
    方法慢性HBV感染患者180例,其中,无症状HBV携带者13例,慢性乙型肝炎者75例,HBV相关肝硬化及肝癌分别为62、30例。Qiagen法提取血清HBV-DNA,常规PCR扩增目的基因,纯化PCR产物ABI377DNA自动测序仪直接双向测序。直接测序失败者,回收目的DNA与PMD-18T载体连接,克隆质粒双向测序。DNAStar软件包的SeqMan软件进行生物信息分析。
    结果 Bcp/pc区点突变包括nt 1753、nt 1762 、nt 1764 、nt 1776 、nt 1803、nt 1846 、nt 1896。HBV携带者、慢性乙型肝炎、HBV相关肝硬化及肝癌患者nt 1762(nt 1764)点突变率分别为 7.7%、68.0%、72.7%(68.0%)及90.9%(81.8%),肝癌患者G1896A突变频率占54.6%。A1762T+G1764A联合突变占36%;A1762T、G1764A、G1896A联合突变占11%;T1753A/C、A1762T、G1764A、G1896A发生率为7%。克隆测序显示,肝硬化及肝癌患者bcp区起始点A1727G点突变率分别为72%、63%。HBeAg阴性患者存在更多的基因变异(P=0.022),G1776A和G1896A突变是HBeAg阴性的独立预测因素(P<0.05)。Bcp区点突变与HBeAg阴性无明显关系。肝硬化和肝癌患者pres基因缺失突变频率最高,肝癌及肝硬化患者pres1pres2及pres1+s2缺失频率分别为7.1%、71.4%、7.1% 及41.2%、58.8%、29.4%(P<0.05)。
    结论 A1727G、A1762T、G1764A及A1762T/G1764A联合突变、pres缺失在HBV相关肝硬化及肝癌患者多见,可能是肝脏疾病进展的危险因素,G1776A和G1896A突变是HBeAg阴性的独立预测因素。Bcp/pc点突变及pres区缺失可能为肝癌发生的早期预测因素,值得进一步研究。
    复合花粉制剂改善CCl4诱导肝硬化大鼠血浆氨基酸失衡
    孔明;时红波;陈宫;赵军;丁美;段钟平;陈煜
    2011, 32(3):  331-336. 
    摘要 ( 1407 )   PDF (999KB) ( 332 )  
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    目的 观察复合花粉制剂对CCl4诱导的肝硬化模型大鼠的血浆氨基酸浓度的影响。
    方法 将45只SD大鼠采用抽签法随机分为模型组(35只)和对照组(10只)。对照组与模型组动物给予同样的基础饮食;模型组按照每100 g体质量0.2 mL的剂量,腹腔注射40% CCl4 葵花籽油溶液,每周2次,持续12周,待病理证实肝硬化形成,停止注射CCl4。12周时32只大鼠造模成功,对照组大鼠全部存活,营养素干预前处死模型组大鼠4只,对照组大鼠3只,检测基线血浆氨基酸浓度;余7只对照大鼠分别于营养素干预2周、4周后处死;余28只模型组大鼠随机分为组1(模型对照组)、组2(复合花粉营养素)、组3(高剂量Noveliver营养素)、组4(低剂量Noveliver营养素),分别于营养素干预2、4周后处死,检测各组干预后2、4周血浆氨基酸浓度。
    结果 ① 基线血浆氨基酸浓度:模型组血浆支链氨基酸及芳香族氨基酸浓度均低于对照组,但2组支链/芳香族氨基酸比值差异无统计学意义(分别为1.48±0.05和1.48±0.13)。② 营养素干预2周后血浆支链氨基酸:组3高于组4和组2;芳香族氨基酸:组2和组3低于其余3组;支链/芳香族氨基酸比值:对照组、组1、2、3、4分别为1.54±0.11、1.59±0.43、1.82±0.11、1.98±0.55和1.58±0.04,组3和组2明显高于其余3组。③ 营养素干预4周后血浆支链氨基酸:3组营养干预组(组2、3、4)均高于模型对照组(组1),其中组3高于组4;芳香族氨基酸:组2和组4低于其余3组;支链/芳香族氨基酸比值:正常对照组、组1、2、3、4分别为1.44±0.14、1.16±0.35、1.40±0.24、1.51±0.08和1.40±0.15,3组营养干预组(组2、3、4)均高于模型对照组(组1),其中组3高于组4。
    结论 CCl4所致肝硬化大鼠血浆氨基酸整体水平低于正常对照组大鼠;复合花粉制剂营养素干预有提高血浆支链氨基酸水平和支链/芳香族氨基酸比值的趋势,且高剂量Noveliver效果优于低剂量Noveliver,干预4周时效果优于2周时的结果。本实验提示复合花粉制剂有一定改善肝硬化大鼠血浆氨基酸失衡的作用。本研究为临床肝硬化患者氨基酸失衡的治疗提供了参考。
    感染HIV-1儿童经抗病毒治疗后乳酸浓度检测及其相关因素研究
    石英△;孙玉△;张洪海;计云霞;乔录新;丁渭;张玉林;陈德喜
    2011, 32(3):  337-340. 
    摘要 ( 1195 )   PDF (767KB) ( 248 )  
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    目的 研究中国感染艾滋病毒(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)儿童经抗病毒治疗后血浆乳酸浓度及相关影响因素。
    方法 选择31例抗病毒治疗的感染HIV-1儿童与30例正常对照儿童,检测血浆乳酸浓度,结合儿童的基本信息、治疗方案及实验室检测结果进行综合分析。
    结果 感染HIV-1患儿血浆乳酸浓度(2.32±0.60)mmol/L显著高于对照组儿童(1.60±0.88)mmol/L(P<0.01);d4T治疗组和AZT治疗组间血浆乳酸浓度、基线CD4+T淋巴细胞计数、基线病毒载量、性别、年龄以及HIV-1传播途径差异均无统计学意义(P>0.05)。
    结论 外周血乳酸浓度可反映感染HIV-1儿童经抗病毒治疗后的线粒体毒性,有望成为线粒体毒性检测指标。
    TRIM5α抗HIV-1功能的研究
    李岚;陆庆宇;张森燕;王新泉;吴昊
    2011, 32(3):  341-345. 
    摘要 ( 810 )   PDF (477KB) ( 232 )  
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    目的 研究TRIM5α抗HIV-1功能。
    方法 从vero细胞中提取总RNA,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术获得非洲绿猴TRIM5α全基因序列。用PCR技术从人、恒河猴和非洲绿猴TRIM5α全基因序列中扩增B30.2和coiled coil等功能片段。将测序鉴定过的目的基因克隆到真核表达载体pEGFP-C3上,与绿色荧光蛋白融合表达,荧光显微镜观察目标蛋白在细胞内的定位。利用VSV-G膜蛋白质粒和HIV-1骨架质粒包装假病毒,通过假病毒感染实验定量检测TRIM5α及其功能片段对HIV-1的抑制功能。
    结果 成功地构建了带有绿色荧光蛋白标签的TRIM5α及其功能片段真核表达质粒。人、恒河猴和非洲绿猴TRIM5α及其功能片段蛋白均定位于细胞质,其中hTRIM5α、rhTRIM5α、AGMTRIM5α、rh-TRIM5αCC/B30.2、AGM-TRIM5αCC/B30.2融合蛋白以高聚状态存在于胞质内,而h-TRIM5αCC/B30.2和不同种属TRIM5αB30.2融合蛋白则均匀分布于胞质内。恒河猴和非洲绿猴TRIM5α及CC/B30.2对HIV-1假病毒的抑制率均达70%,而人TRIM5α及各种属B30.2对假病毒的抑制率低于20%。
    结论 恒河猴和非洲绿猴TRIM5α CC/B30.2功能结构域对HIV-1有拮抗作用,为TRIM5α最小功能结构域的确定及结构的解析提供了可靠的实验依据。
    北京基因型结核分枝杆菌感染THP-1细胞系表达谱的研究
    李卫民;黄海荣;高峰;刘毅;范伟兴;戴广明;姜广路;宋小运;赵立平;付玉红
    2011, 32(3):  346-351. 
    摘要 ( 1302 )   PDF (1315KB) ( 373 )  
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    目的 通过分析不同结核分枝杆菌感染巨噬细胞后表达谱的改变,探讨结核病(tuberculosis,TB),尤其是北京基因型结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis M.tb)感染的结核病免疫发病机制。
    方法 具有IS6110 DNA RFLP和Spoligotyping基因分型结果的265株北京基因型结核分枝杆菌(简称M.tb Beijing genotype)鉴定自2000年中国结核病流行病学抽样调查(简称2000年流调),采用平均连锁方法计算北京基因型结核分枝杆菌中心菌。结核分枝杆菌(M.tb H37Rv)、牛分枝杆菌(M. bovis)标准菌株和M.tb Beijing genotype感染THP-1细胞,采用基因芯片分析其表达谱的改变。结果输入MAS系统,行进一步的分析。
    结果 依据计算原则, 相似系数最大为0.514,其对应菌株为结核分枝杆菌北京基因型中心菌株。分枝杆菌感染THP1细胞后相应的芯片结果具有可靠性和可分析性。M.tb H37RvM.bovisM.tb Beijing genotype感染THP-1细胞的共同表达293个基因。共同表达基因的GO和pathway分析,发现一些不为人特别关注,但对结核免疫有一定作用的信号通路,例如B细胞受体信号通路。M.tb H37RvM.tb Beijing genotype感染THP-1细胞差异表达基因包括:tnf,tnfrsf 9pim-1icam-1cd48
    结论 2000年结核病流调以中国人口为整体,采用分层整群随机抽样。因此获得的M.tb Beijing genotype中心菌株具有中国代表性。293个基因可作为筛选用于菌阴结核病诊断的候选靶标。对这些差异表达基因涉及的信号通路,例如:JAK-STAT信号通路和自然杀伤细胞介导的细胞毒性以及TNF的深入分析,将对理解M.tb Beijing genotype免疫毒性特征有益。
    糖化血清白蛋白、空腹血糖、糖化血红蛋白在肝源性糖尿病中的意义
    何玉兰△;赵娟△;刘雪梅;张汾燕;李娟;于红卫;王金环;孟庆华
    2011, 32(3):  352-355. 
    摘要 ( 1074 )   PDF (807KB) ( 491 )  
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    目的 比较肝源性糖尿病患者与肝炎肝硬化患者血清中的糖化血清白蛋白(glycosylated serum,GA)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)浓度,评价其在监测肝源性糖尿病糖代谢过程中的意义。
    方法 以27例肝源性糖尿病及54例肝炎肝硬化患者为研究对象,取入院患者次日晨起空腹血清分别检测GA、FBG、HbA1c。
    结果 ① 肝源性糖尿病组GA值、HbA1c值均明显高于对照组,2组差异有统计学意义(P<0.01)。② 肝源性糖尿病组,FBG大于7.0 mmol/L者占66.7%(18/27);HbA1c大于6.5%者占22.2% (6/27);GA高于16.87%者占92.6%(25/27)。肝硬化组FBG大于7.0 mmol/L者占3.7%(2/54);HbA1c大于6.5%者占1.8%(1/54);GA高于16.87%占25.9%(14/54)。
    结论F BG和HbA1c对于肝源性糖尿病诊断的特异度高,灵敏度低,GA对于肝源性糖尿病诊断的灵敏度高,但特异度低,所以对肝源性糖尿病的诊断三个检测指标结合使用更有价值。
    小肝移植物与小肝综合征
    林栋栋;卢实春;李宁
    2011, 32(3):  356-360. 
    摘要 ( 829 )   PDF (1063KB) ( 379 )  
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    小肝移植物和小肝综合征是限制成人活体肝移植进一步应用的重要因素。小肝移植物是指移植物与受者质量比小于0.8%或移植物体积与受者标准肝体积比小于40%。小肝综合征是指移植物不能满足受者的功能需要,引起肝功能障碍,包括凝血病、腹水、长期胆汁淤积和脑病,甚至伴有肺功能衰竭和肾功能衰竭,如果不行再次肝移植常会导致受者死亡。小肝综合征的发生与多种因素有关,如移植物大小、潜在病变、再生能力、流入道、流出道情况,受者病情轻重等。门静脉过度灌注、静脉病变、肝动脉缓冲效应在小肝综合征早期和晚期的临床和组织病理学表现中起重要作用。小肝综合征的防治措施,主要集中在两个方面:选择更大的移植物和进行门静脉压力和血流的调控。门静脉压力和血流的调控,可能是成功采用更小移植物进行成人活体肝移植的关键所在。
    基础研究
    大鼠不同脑区线粒体中α-突触核蛋白含量与各种氧化和抗氧化指标的关系
    孙九艳;李昕;刘光伟;程芙蓉;李尧华;于顺
    2011, 32(3):  361-364. 
    摘要 ( 1416 )   PDF (1515KB) ( 223 )  
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    目的 分析大鼠不同脑区线粒体中α突触核蛋白(α-synuclein,α-SYN)含量与氧化应激水平及其相互关系,探讨帕金森病(Parkinson’s disease,PD)选择性损伤神经元的原因。
    方法 采用Percoll密度梯度离心法提取脑组织线粒体、Western blotting法和ELISA法测定线粒体中α-SYN含量;通过检测脑组织主要氧化指标丙二醛(malonaldehyde,MDA)和抗氧化指标总抗氧化能力(total anti-oxidation capability,T-AOC)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量判定氧化应激水平。
    结果 不同脑区线粒体中的α-SYN含量不同,其中,PD易损区纹状体、海马与嗅球中的线粒体中α-SYN的含量较高,而PD非易损区额叶皮质和小脑中的线粒体中α-SYN含量较低,易损区与非易损区线粒体中的α-SYN含量的差异有统计学意义。不同脑区各种氧化和抗氧化指标应有所不同,但差异无统计学意义,与线粒体中的α-SYN含量没有明显关系。
    结论 不同脑区线粒体中α-SYN含量不同,但与氧化应激水平无相关性。

    反转录巢式多重聚合酶链式反应体系检测单细胞中时钟基因表达
    袁艳鹏;关云谦;林庆玲;薛金花;蔡彦宁
    2011, 32(3):  365-370. 
    摘要 ( 1401 )   PDF (385KB) ( 262 )  
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    目的 建立一种高度灵敏的能够在单细胞水平检测时钟基因表达的反转录巢式多重聚合酶链式反应(multiplex nested reverse transcription-polymerase chain reaction,multiplex nested RT-PCR)体系。
    方法 选取核心时钟基因bmal1clockper1per2cry1cry2,以及看家基因β-actin,分别设计和优化巢式引物对。以基因质粒为模板,检测巢式多重PCR体系的灵敏度。体外转录得到各个基因的RNA模板,并检测反转录巢式多重PCR体系的灵敏度。使用手动微操作器,显微镜下负压获取悬浮单个NIH/3T3细胞, 使用反转录巢式多重PCR体系检测其中目的时钟基因。应用实时定量PCR检测整体水平时钟基因表达情况,与单细胞水平进行比较。
    结果 巢式多重PCR检测体系可以检测出单拷贝质粒DNA。反转录巢式多重PCR能够检测出4拷贝RNA模板。利用上述体系发现,NIH/3T3单细胞中时钟基因环路表达存在很大差异,同时发现群体水平per1per2表达的高峰和低谷间差异有统计学意义,而单细胞水平per1表达则差异无统计学意义。
    结论 建立了高度灵敏的用于检测时钟基因表达的反转录巢式多重PCR体系,揭示了单细胞水平时钟基因表达的异质性,也验证了整体水平与单细胞水平时钟基因表达的差异。

    其他
    补白
    2011, 32(3):  370-370. 
    摘要 ( 310 )   PDF (71KB) ( 130 )  
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    基础研究
    褐藻多糖硫酸酯对组织蛋白酶B活性影响的实验研究
    张甘霖;朱晓新;李萍
    2011, 32(3):  371-374. 
    摘要 ( 1095 )   PDF (1155KB) ( 239 )  
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    目的 研究褐藻多糖硫酸酯(Fucoidan)对氧化应激损伤及溶酶体组织蛋白酶B活性的影响,探讨Fucoidan用于中枢神经系统疾病的作用机制。
    方法 50 μg·L-1神经生长因子(nerve growth factor,NGF)分化大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞(differentiated PC12,dPC12)7 d,0.5 mmol/L H2O2刺激30 min,给予10 mg·L-1 Fucoidan干预。酶标仪检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及活性氧(reactive oxygen species,ROS)活性;荧光底物法检测细胞质中溶酶体组织蛋白酶B的活性;酶-底物法检测不同浓度Fucoidan(0.1、1、10、50、100 mg·L-1)对人肝脏溶酶体组织蛋白酶B活性的影响。
    结果 氧化损伤后细胞中ROS显著升高达正常水平的185.2%,伴有SOD下降,溶酶体组织蛋白酶B活性上升至正常水平的236.7%;Fucoidan对SOD活性没有明显影响,能降低ROS水平,且对细胞质内和人肝脏溶酶体组织蛋白酶B的活性均具有抑制作用。
    结论 Fucoidan降低活性氧含量抗氧化损伤的作用可能与其抑制溶酶体组织蛋白酶B的活性有关。

    HPLC法测定大枣环磷酸腺苷(c-AMP)的含量
    郜文;丁兆毅;徐菲;郭建强
    2011, 32(3):  375-378. 
    摘要 ( 1118 )   PDF (1030KB) ( 665 )  
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    目的 建立大枣环磷酸腺苷(cyclic adenosine 3′,5′-monophosphate,c-AMP)含量的测定方法。
    方法 高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC),采用MGC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为0.05 mol/L KH2PO4-Methanol(90:10-10:90);梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为30 ℃。
    结果 c-AMP在15.6~500.0 ng 范围内呈良好的线性关系(r=1.000),平均回收率为100.35%±1.58%,RSD为1.58%。
    结论 本方法操作简便、灵敏度高、准确性和重现性好,可作为大枣的质量控制方法。

    检测中草药提取物中黄曲霉毒素的高灵敏方法
    赵淑锐;徐艳霞;徐菲;郜文
    2011, 32(3):  379-383. 
    摘要 ( 1148 )   PDF (1168KB) ( 314 )  
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    目的 建立中草药提取物中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的高灵敏测定方法。
    方法 样品经提取和过滤后用免疫亲和柱净化和衍生,然后采用不同比例(15%~30%)乙腈/水梯度洗脱,用具荧光检测器的高效液相色谱仪检测。
    结果 检出限:黄曲霉素G1为0.09 ppb;B2为0.02 ppb;B1为0.03 ppb;G2为0.04 ppb,均低于文献报道的检出限,样品加标回收率为90%~103.2%。
    结论 该方法简单、快速、准确、灵敏度高,可用于中药中黄曲霉毒素含量的测定。

    尼美舒利、阿司匹林对COX-2不同表达水平的食管鳞癌细胞株的抑制作用
    周巧直;孟欣颖;朱圣韬;张澍田
    2011, 32(3):  384-387. 
    摘要 ( 1361 )   PDF (1394KB) ( 206 )  
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    目的 比较选择性和非选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂对不同COX-2表达水平的食管鳞癌细胞的抑制作用。
    方法 选取食管鳞癌细胞株EC109和TE-1,采用Western blotting法测定COX-2蛋白表达、MTT法检测细胞增生以及流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡(PI标记),观察阿司匹林及尼美舒利对2株细胞增生、凋亡的作用。
    结果 Western blotting结果显示,EC109细胞表达COX-2,TE-1细胞不表达COX-2。选择性COX-2抑制剂尼美舒利可抑制EC109细胞的增生,抑制率为(17.5±3.3)%~(80.1±3.9)%。尼美舒利仅在0.4 mmol/L时对TE-1细胞有抑制作用,抑制率为(16.2±7.0)%。尼美舒利可使EC109细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡,但对TE-1细胞无上述作用。非选择性COX-2抑制剂阿司匹林在0~4 mmol/L浓度区间对EC109和TE-1均有抑制作用,并呈剂量依赖关系。阿司匹林作用后,EC109与TE-1的细胞周期均被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率分别为(10.55±0.01)%及(8.52±6.65)%。
    结论 食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞株中COX-2的表达水平影响了选择性COX-2抑制剂的抑制作用,而对非选择性COX-2抑制剂影响较小。阿司匹林可能通过非COX-2依赖途径从而发挥对肿瘤的抑制作用。

    临床研究
    原发性高血压病患者大动脉僵硬度与肌酐清除率的相关性
    谭静;华琦;闻静;邢绣荣;刘荣坤;杨峥
    2011, 32(3):  388-391. 
    摘要 ( 1241 )   PDF (1045KB) ( 287 )  
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    目的 探讨原发性高血压病患者主动脉脉搏波速度(pulse wave velocity,PWV)与肌酐清除率(creatinine clearance rate,Ccr)的相关性。
    方法 应用脉搏波速度自动测量系统测量颈动脉股动脉脉搏波速度(carotidfemoral PWV,CFPWV),对644例血肌酐小于178mmol/L的原发性高血压患者(男340例,女304例,年龄18~82岁,平均52岁)进行脉搏波速度检测,并检测空腹血糖、血脂、肾功、尿酸等血生化指标,根据Cockcroft-Gault 公式计算Ccr。
    结果 CFPWV在Ccr≥90 mL/min、90 mL/min>Ccr≥60 mL/min和Ccr<60 mL/min 3组间逐渐升高(P均<0.01),相关性分析显示CFPWV与Ccr呈显著负相关(P<0.001),Logistic回归分析得出CFPWV是影响高血压肾功能减退的独立因素。
    结论 大动脉僵硬度增加与高血压早期肾功能减退相平行,可以反映高血压靶器官损害。

    PKC-β抑制剂LY333531对糖尿病肾脏NADPH氧化酶与SOD蛋白表达的影响
    高霞;叶凤;周赤燕;刘慧敏;徐援;夏正远;雷少青;
    2011, 32(3):  392-396. 
    摘要 ( 1445 )   PDF (1670KB) ( 277 )  
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    目的 研究蛋白激酶C(protein kinase,PKC)-β抑制剂LY333531对糖尿病肾脏尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的影响。
    方法 24只SD雄性大鼠(240~260 g),采用抽签法随机分为正常对照组(normal control,NC)、 糖尿病组(diabetes mellitus,DM)及LY333531(LY)治疗组。LY组灌胃给予PKC-β抑制剂LY333531〔1 mg/(kg·d)〕治疗4周后测量血糖、肾质量/体质量、24 h 尿蛋白、内生肌酐清除率(creatinine clearance rate,Ccr)、游离15-F2tIsoprostane、总抗氧化浓度及SOD活性。Western blotting分析NADPH氧化酶亚基P22phox与P67phox,SOD亚型Cu/Zn-SOD与Mn-SOD蛋白改变。
    结果 与NC组比较,DM组血糖、肾质量/体质量、24 h尿蛋白、Ccr、血浆与肾脏中15-F2t-Isoprostane、血浆总抗氧化浓度及P22phox与P67phox表达明显增加,而肾脏总抗氧化物浓度、血浆与肾脏SOD活性、Cu/Zn-SOD及Mn-SOD蛋白表达明显减少(P<0.05)。LY333531除对血糖与Mn-SOD的表达无显著影响外,均能显著逆转上述变化。
    结论 LY333531通过抑制糖尿病肾脏NADPH氧化酶的活化与表达,及促进Cu/Zn-SOD的表达而恢复SOD活性,以减少早期糖尿病肾脏的氧化损伤,从而发挥其保护肾脏作用。

    B型利钠肽与心肾综合征相关性的临床研究
    赵娜新;陈海平
    2011, 32(3):  397-400. 
    摘要 ( 716 )   PDF (955KB) ( 284 )  
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    目的 探讨B型利钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)与心肾综合征发病的相关性,为指导临床治疗提供理论依据。
    方法 以216例急慢性心力衰竭患者为研究对象,根据有无肾功能损害将其分为单纯心衰组(113例)和心肾综合征组(103例)。测量2组患者血液中BNP及氨基末端B型利钠肽前体(N-terminal prosoma of B-type natriuretic peptide,NT-ProBNP)的浓度。并通过随访,比较2组患者30 d病死率的差异。
    结果 同单纯心衰组相比,心肾综合征组患者BNP与NT-ProBNP的浓度均明显升高,分别为334.00(180.50~628.00)pg/mL vs 794.00(509.00~1 620.00) pg/mL(P<0.01),22.51(13.09~35.26) ng/mL vs 32.62(21.10~61.24) ng/mL(P<0.01)。同单纯心衰组相比,心肾综合征组30 d病死率明显升高,为7.1% vs 24.3%(P<0.01)。
    结论 BNP的失代偿是导致心肾综合征发病的因素之一。合并肾功能损害的心功能不全患者预后更差,短期内病死率明显增高。

    非编织补片和编织补片在腹腔镜腹股沟疝修补术中应用的对比研究
    王明刚;陈杰;申英末;朱熠林;杨硕
    2011, 32(3):  401-403. 
    摘要 ( 1000 )   PDF (758KB) ( 271 )  
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    目的 探讨非编织补片在腹股沟疝腹腔镜修补术中应用的安全性、有效性以及术后合并症和补片的皱缩率情况。
    方法 2009年1月至2009年6月,对60例初发腹股沟疝患者进行腹腔镜疝修补手术治疗,随机选择非编织补片和编织补片,分析患者资料,包括手术时间、术后住院时间、住院费用、围术期合并症发生率,术后9~14个月随访慢性疼痛、异物感的发生率以及复发率和测定补片皱缩率等。
    结果 60例患者手术无中转,非编织补片组和编织补片组平均手术时间、术后住院天数、术后血清肿以及住院费用方面差异均无统计学意义,术后慢性疼痛非编织组1例(3.3%)明显少于编织组3例(10%),编织组异物感5例(16.7%)明显高于非编织组2例(6.7%)。术后超声实测补片1、3、6、9个月横径皱缩变化,术后1个月起非编织组补片横径皱缩明显低于编织组(P<0.05),差异具有统计学意义。
    结论 腹腔镜疝修补术使用非编织补片和编织补片均是安全有效的,非编织补片术后皱缩率明显低于编织补片,非编织补片术后慢性疼痛和异物感的发生率低于编织补片。

    视神经管减压术在颅眶骨纤维异常增生症中的应用
    张家亮;赵尚峰;刘浩成;张天明;傅继弟
    2011, 32(3):  404-407. 
    摘要 ( 776 )   PDF (560KB) ( 267 )  
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    目的 回顾性分析36例经颅显微视神经管减压术治疗因颅眶骨纤维增生症致视神经管狭窄和视力损害的患者的临床疗效。
    方法 采用内分泌检查、眼科学检查以及影像学检查,对本组患者进行术前评估,手术采取经颅显微视神经管减压术。
    结果 本组患者术后病理均为骨纤维异常增生症。本组患者均行三维螺旋CT骨窗位检查,21例单侧视神经管狭窄,15例双侧视神经管狭窄。18例行MRI检查,多数病变位于前中颅底,增强后呈中、轻度强化。本组患者均获得3个月至7年的有效随访,平均38个月。术后1周20侧(19例)术后视力较术前改善,21侧(15例)术后视力稳定在术前水平,2侧(2例)术后出现视力恶化。术前失明组均没有视力改善。术后长期随访(>1年)视力改善和稳定组中,分别有1例和3例出现视力恶化。
    结论 经颅显微视神经管减压术对于治疗额眶骨纤维增生症致视力障碍的患者中期治疗疗效满意。

    非体外循环冠状动脉旁路血管移植术围术期死亡危险因素分析
    卢家凯;董秀华;卿恩明;王义军;任发成;王学勇;梁孝平;吴宪宏;王成彬;王慧敏;王嵘
    2011, 32(3):  408-413. 
    摘要 ( 1224 )   PDF (954KB) ( 222 )  
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    目的 分析非体外循环冠状动脉旁路血管移植术(off-pump coronary artery bypass grafting,OPCABG)围术期死亡的危险因素。
    方法 采用麻醉科OPCABG围术期数据库,回顾性分析了首都医科大学附属北京安贞医院自2007年11月至2009年2月2 379例OPCABG患者围术期资料,将与术中及术后10 d内死亡有统计学意义的单因素进行Logistic回归分析。
    结果 全组围术期死亡患者32例,病死率为1.3%。单因素分析表明术后应用透析(P<0.01,OR=23.791)、术前射血分数(ejection fraction,EF)<40%(P<0.001,OR=6.903)、术中室颤(P<0.025,OR=5.292)、急诊手术(P=0.009,OR=4.539)、术中应用主动脉内球囊反搏 (intra-aortic ballon pump,IABP)(P=0.009,OR=4.488)、性别(P=0.018,OR=2.312)、术前心肌梗死史(P=0.025,OR=2.180)与年龄(P=0.027)为围术期死亡的危险因素,女性病死率高于男性(男性 19/1 830,女性 13/549)。Logistic回归分析显示术后应用透析(P<0.001,OR=26.141)、术前射血分数<40%(P<0.001,OR=8.436)、急诊手术(P=0.003,OR=5.039)与性别(P=0.026,OR=0.418)为围术期死亡的独立危险因素。
    结论 术后应用透析治疗、性别、术前EF<40%和急诊手术是OPCABG患者围术期死亡的独立危险因素。加强围术期肾保护、积极维护心功能、提高急诊和女性OPCABG患者围术期处理水平,有利于控制OPCABG围术期病死率。

    妊娠合并卵巢肿瘤的诊治
    周莲娥;王香平
    2011, 32(3):  414-416. 
    摘要 ( 1387 )   PDF (411KB) ( 358 )  
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    目的 探讨妊娠合并卵巢肿瘤的临床特点及诊断治疗方法。
    方法 回顾性分析2002年1月至2009年12月首都医科大学宣武医院59例妊娠合并卵巢肿瘤患者的临床资料。
    结果 妊娠合并卵巢良性肿瘤,以成熟性畸胎瘤为主,占89%,多数患者无明显症状。
    结论 超声诊断有一定局限性;选择正确的治疗方法进行治疗不影响妊娠结局;血清CA199在卵巢成熟性畸胎瘤的诊断中有一定的参考价值;血清CA125在妊娠早期对卵巢良恶性肿瘤的鉴别是否有意义有待于进一步探讨。

    妈富隆和米非司酮治疗围绝经期功能失调性子宫出血的临床疗效及对性激素浓度的影响
    孙敏玲
    2011, 32(3):  417-420. 
    摘要 ( 978 )   PDF (200KB) ( 495 )  
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    目的 观察妈富隆治疗围绝经期功能性子宫出血的临床疗效及对血清性激素浓度的影响。
    方法 100例围绝经期功能失调性子宫出血患者随机分为治疗组和对照组,对照组在诊断性刮宫术后3 d给予米非司酮治疗,治疗组在诊断性刮宫术后3 d给予妈富隆治疗。采用放射免疫法测定患者治疗前后3项血清性激素浓度,包括促卵泡生成素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌激素(estradiol,E2);记录两组控制出血时间和完全止血时间,B超检查子宫内膜厚度,病理检查观察子宫内膜病理改变,观察不良反应;随访结束后评价临床疗效。
    结果 治疗组临床疗效总有效率为98.0%,显著高于对照组(88.0%),差异有统计学意义(P<0.05);治疗组控制出血时间和完全止血时间均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组FSH、LH、E2浓度下降,与治疗前和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);而治疗前后对照组血清性激素浓度比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,治疗组子宫内膜为(4.04±0.41)mm,对照组为(6.69±0.78)mm,2组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,治疗组均为正常子宫内膜,而对照组有11例病理检查结果仍为简单型增生过长,2组病理结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。2组不良反应轻微。
    结论 妈富隆治疗围绝经期功能失调性子宫出血能够抑制血清FSH的释放,使内源性E2和LH下降,临床疗效显著,安全可靠,值得临床推广应用。

    口服云南白药对下颌阻生智齿拔除术后面部肿胀影响的评价
    董辉;郭婷婷;周侠;冯春丽;夏登胜
    2011, 32(3):  421-425. 
    摘要 ( 823 )   PDF (472KB) ( 330 )  
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    目的 评价口服云南白药对埋伏下颌阻生智齿拔除术后面部反应性肿胀的缓解情况。
    方法 48例下颌埋伏阻生智齿患者按随机数字表法分为实验组和对照组,每组24例,于术前3 d开始,连续8 d口服云南白药胶囊或安慰剂胶囊。分别在术前以及术后第1天、第3天和第5天进行面部三维扫描,重建面部三维模型,利用逆向工程技术软件测定术后不同时间点面部肿胀的体积和厚度,分析两组患者术后面部肿胀度、疼痛强度和张口度。
    结果 口服云南白药组和口服安慰剂组在不同时间点所测定的疼痛强度和张口度差别均无统计学意义,而2组间面部肿胀厚度和肿胀度差异有统计学意义。
    结论 下颌埋伏阻生智齿拔除术中采用围术期口服云南白药胶囊对预防和治疗术后面部反应性肿胀有一定的疗效。

    无创评估肝硬化患者食管和(或)胃底静脉曲张因素的分析
    李琴;苏强;王婧;李卉慧;马颖杰;赵志海;钱林学;曹邦伟;贾继东;王宝恩
    2011, 32(3):  426-430. 
    摘要 ( 1046 )   PDF (252KB) ( 268 )  
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    目的 探讨无创评估肝硬化患者有无食管和(或)胃底静脉曲张的指标或模式。
    方法 收集乙型病毒性肝炎肝硬化患者58例,有食管和(或)胃底静脉曲张的患者34例。检测血常规、肝功能全套项目、凝血因子,同时行B超与胃镜的检查。
    结果 肝硬化患者静脉曲张组与无静脉曲张组比较:血小板,凝血酶原活动度(prothrombin time activity,PTA),活化部分凝血活酶时间,凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ,纤维蛋白原,D-二聚体,肝功能指标(前白蛋白、白蛋白、总胆红素、总胆汁酸、胆碱酯酶),门脉宽度,脾脏厚度差异均有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析,Logit P=12.280×门脉宽度+2.901×脾脏厚度-0.145×PTA-17.746,P为预测肝硬化患者发生静脉曲张的概率,预测准确率为68.0%,敏感度为69.2%,特异度为66.6%。Child-Pugh A级患者静脉曲张组与无静脉曲张组比较:PTA,D-二聚体,凝血因子Ⅱ、Ⅸ,血小板,脾脏厚度,门脉宽度差异有统计学意义(P<0.05)。
    结论 PTA、脾脏厚度、门脉宽度可能有助于预测乙肝肝硬化患者有无食管和(或)胃底静脉曲张。

    北京市平谷区3~6岁幼儿反复呼吸道感染发病情况及影响因素调查
    刘卫红;徐雯洁;张会娜;刘国中;郑军;丁丹丹;胡安宁;李萍
    2011, 32(3):  431-435. 
    摘要 ( 934 )   PDF (234KB) ( 389 )  
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    目的 调查北京市平谷区3~6岁幼儿反复呼吸道感染发病情况及其影响因素。
    方法 制定调查问卷表,按分层整群随机抽样的方法,在平谷区4个幼儿园3~6岁幼儿中进行问卷调查,由家长填写问卷,调查2008年1月到2008年12月间幼儿反复呼吸道感染的发病情况及影响因素。利用Epidata3.1录入数据,导出数据后利用SPSS 13.0软件包进行数据分析,3组间计数资料用χ2检验、计量资料用两独立样本t检验或秩和检验分析;多因素分析采用非条件Logistic逐步回归分析。
    结果 平谷区3~6岁在园儿童反复呼吸道感染的发病率为18.7%,影响幼儿反复呼吸道感染发病情况的主要因素有母亲孕期是否健康,幼儿家长是否有过敏史,幼儿是否为早产,幼儿是否有哮喘史等4项。
    结论 影响北京市平谷区幼儿反复呼吸道感染是多因素共同作用的结果,应该采取综合措施对该病进行防治。

    天津市某厂区职工脂肪肝B超筛检结果分析
    吴强;周萱;王秀云;周冰;于春泉;尹立群;蘅明莉;王泓午
    2011, 32(3):  436-438. 
    摘要 ( 814 )   PDF (547KB) ( 230 )  
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    目的 通过对天津市某厂区员工体检,了解其健康状况,对脂肪肝的患病情况进行分析。
    方法 对天津市某企业员工4 912人进行体检和实验室检查,采用B超进行脂肪肝筛检,分析结果与健康人群数据进行比较,分析不同性别人群差异。
    结果 4 912名接受检查职工中,有4 845人接受B超检查,占总人数98.6% ,67人拒绝做B超检查,占总人数1.4% 。B超检查结果有2 916人检查正常,1 929人结果异常,其中,检查出患脂肪肝832人,占实际检查人数17.2%(832/4 845)。男性脂肪肝检出率高于女性(χ2=146.47,P=0.01),差异有统计学意义;血脂异常对脂肪肝患病有影响。
    结论 应加强脂肪肝的健康教育宣传,促进生活方式改善,以预防和控制脂肪肝。
    短篇
    腹腔镜射频消融治疗肝脏肿瘤的初步观察
    2011, 32(3):  439-441. 
    摘要 ( 283 )   PDF (201KB) ( 201 )  
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    名师
    身边的楷模榜样的力量——记首都医科大学生物医学工程学院刘志成教授与他的团队
    陈瑞芳
    2011, 32(3):  442-444. 
    摘要 ( 595 )   PDF (563KB) ( 209 )  
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    刘志成,男,教授,博士生导师。1955年6月生于黑龙江省五常县。1973年4月成为一名北大荒的设者-拖拉机手。1975年10月进入北京大学物理系理论物理专业学习,大学4年,成绩全优。1979年8分配到中国科学院等离子体物理研究所,从事受控核聚变实验研究,驾驶员经历让他在实验装置的安装与调中做出了出色成绩。1980年考取北京师范大学物理系理论物理专业研究生,学习和研究理论天体物理,其章《考虑重子八重态的中子星状态方程》引起了国际反响。1983年6月分配到北京第二医学院(现首都医科学)基础部物理教研室工作。1992年,被评为“北京市优秀青年骨干教师”,1993年,荣获“首都医科大学首十佳青年”称号。其作为主要参加人申办的“假肢矫形工程”本科专业填补了国家教育空白。2006年,被评“北京市优秀教师”,“北京市总工会教育创新标兵”。2007年,他被聘为“教育部生物医学工程教学指导委会”委员,同年被评为“北京市级教学名师”。