结核分枝杆菌黏附素HBHA的克隆表达及其免疫原性研究

首都医科大学学报 ›› 2006, Vol. 27 ›› Issue (2): 162-165.

结核分枝杆菌黏附素HBHA的克隆表达及其免疫原性研究

李传友, 张旭霞, 张健源, 李卫民, 田苗, 邱云青, 孙照刚, 李妍, 端木宏谨

北京市结核病胸部肿瘤研究所细菌免疫室

收稿日期:2006-02-28 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-04-24 发布日期:2006-04-24

Cloning and Expression of Heparin-binding Haemagglutinin Adhesin of Mycobacterium Tuberculosis and Its Immungenicity

Li Chuanyou, Zhang Xuxia, Zhang Jianyuan, Li Weimin, Tian Miao, Qiu Yunqing, Sun Zhaogang, Li Yan, Duanmu Hongjin

Department of Bacteriology and Immunology, Beijing TB & Thoracic Tumor Research Institute

Received:2006-02-28 Revised:1900-01-01 Online:2006-04-24 Published:2006-04-24

摘要/Abstract

摘要： 目的应用克隆表达技术从大肠杆菌中获得重组的结核分枝杆菌黏附素HBHA蛋白,并以HBHA免疫小鼠观察抗HBHA抗体的产生并探讨其免疫原性.方法 1)应用PCR技术扩增结核分枝杆菌hbhA编码基因的特异片段.2)结核分枝杆菌hbhA编码基因的克隆及在大肠杆菌中的表达.3)应用克隆表达的HBHA蛋白免疫小鼠,并用ELISA法测定小鼠血清抗HBHA抗体水平.结果 1)结核分枝杆菌hbhA基因成功地克隆到PET-32 a(+)表达载体中,并在大肠杆菌中获得了高效表达.重组HBHA主要存在于包涵体中,纯化包涵体并获得了大量的重组HBHA.2)重组HBHA免疫小鼠可产生较高水平的抗HBHA抗体(＞1:102 400),表明重组HBHA在纯化过程中仍保留较强的免疫原性.结论结核分枝杆菌黏附素HBHA具有较好的免疫原性.

关键词: 分枝杆菌, 结核, 黏附素, 表达, 免疫原性

Abstract: Objective To clone and express hbhA gene of M.tuberculosis,and observe production of anti-HBHA antibody and its immunogenicity from mouse serum.Methods 1) The hbhA coding gene of M.tuberculosis were amplified by PCR method.2) hbhA gene was cloned into E.coli for expression of specific protein.3) HBHA was injected into mouse and observed production of anti-HBHA antibody by ELISA method.Results 1) The hbhA gene of M.tuberculosis could be cloned into PET-32a(+) expression vector,and got a high expression.2) The recombinant HBHA increased antibody titer more than 1000000 times of immunized mouse compared with control group.Conclusion HBHA of M.tuberculosis has good immunogenicity.

Key words: Mycobacterium, tuberculosis, adhesin, expression, immunogenicity

中图分类号:

Q939.91
R521

李传友;张旭霞;张健源;李卫民;田苗;邱云青;孙照刚;李妍;端木宏谨. 结核分枝杆菌黏附素HBHA的克隆表达及其免疫原性研究[J]. 首都医科大学学报, 2006, 27(2): 162-165.

Li Chuanyou;Zhang Xuxia;Zhang Jianyuan;Li Weimin;Tian Miao;Qiu Yunqing;Sun Zhaogang;Li Yan;Duanmu Hongjin. Cloning and Expression of Heparin-binding Haemagglutinin Adhesin of Mycobacterium Tuberculosis and Its Immungenicity[J]. Journal of Capital Medical University, 2006, 27(2): 162-165.

[1]	万妍, 刘芳, 郭闪, 吴剑. 非肝硬化乙型肝炎病毒相关肝细胞癌的转录组测序及其对患者生存的影响[J]. 首都医科大学学报, 2023, 44(5): 811-820.
[2]	张健雄, 李丹丹, 胡梦梦, 程雪微, 董瑞华. 羧酸酯酶1和羧酸酯酶2基因表达量与体质量指数的关系及其基因多态性分析[J]. 首都医科大学学报, 2023, 44(1): 13-19.
[3]	粟文婷, 於佳楠, 贾军, 王晓民. 电针对帕金森病模型小鼠纹状体背侧的c-Fos表达的选择性调节[J]. 首都医科大学学报, 2021, 42(6): 986-992.
[4]	段惠娟, 戴广明, 褚洪迁, 杨震, 包城, 何艳萍, 孙照刚. 北京市部分学校肺结核病患者及其密切接触者筛查分析[J]. 首都医科大学学报, 2021, 42(2): 273-279.
[5]	姚健楠, 高天博, 段凌, 刘健, 蒋玉良, 安广宇, 葛洋. 结直肠癌中O-型糖基化相关差异基因的筛选及分析[J]. 首都医科大学学报, 2020, 41(3): 403-410.
[6]	徐文剑, 李巍. 基于全血基因表达谱的脑组织基因表达量预测模型的建立[J]. 首都医科大学学报, 2019, 40(5): 731-737.
[7]	潘丽丽, 杜娟, 任燕龙, 刘文娴. 有结核病史的大动脉炎患者临床特点分析[J]. 首都医科大学学报, 2019, 40(4): 621-626.
[8]	吕霞丽, 李自慧, 潘丽萍, 贾红彦, 张宗德, 刘洋. 乙酰丙酸－十二烷基硫酸钠对结核分枝杆菌的杀灭作用及其安全性毒理学评价[J]. 首都医科大学学报, 2018, 39(6): 894-899.
[9]	牛欢, 程杉, 丁卫. 2018年拉斯克奖(Ⅰ)——基础医学研究奖及医学特殊成就奖[J]. 首都医科大学学报, 2018, 39(5): 778-782.
[10]	王东, 陆普选, 袁虹, 邓群益, 李晶晶. HRCT检查在泌尿系结核影像诊断与指导治疗中的应用价值[J]. 首都医科大学学报, 2016, 37(4): 477-480.
[11]	肖婧, 谢兰品, 董雅坤, 王晓明, 孙琳, 綦辉, 申阿东. 中国汉族儿童TIRAP基因单核苷酸多态性分析未显示其与结核病的易感相关[J]. 首都医科大学学报, 2015, 36(4): 622-629.
[12]	毕阔, 秦佳佳, 杨静, 诸欣平. 旋毛虫膜蛋白新基因Tmp10的免疫筛选及鉴定[J]. 首都医科大学学报, 2015, 36(2): 232-238.
[13]	法朋燕, 刘华, 郑君芳, 王磊, 代元平, 贺俊崎. NHERF3在肾癌组织中的表达变化及其意义[J]. 首都医科大学学报, 2015, 36(2): 251-254.
[14]	张春, 刘军, 蒋宏传, 黄京伟, 曲士颖, 王铁. 乳腺癌相关差异表达基因的筛选及分析[J]. 首都医科大学学报, 2013, 34(1): 1-5.
[15]	韩雪, 李亚明, 李雪娜. ¹⁸F-FDG PET-CT在肺结核诊断中的研究进展[J]. 首都医科大学学报, 2013, 34(1): 49-52.