抗人α-synuclein多克隆抗体的制备和鉴定

首都医科大学学报 ›› 2003, Vol. 24 ›› Issue (1): 7-10.

抗人α-synuclein多克隆抗体的制备和鉴定

刘雪梅¹, 于顺¹, 李尧华¹, 周茗¹, 左晓红¹, 吕国蔚², 陈彪¹

1. 首都医科大学宣武医院老年病研究中心;2. 首都医科大学神经生物学系

收稿日期:2002-10-11 修回日期:1900-01-01 出版日期:2003-01-15 发布日期:2003-01-15
通讯作者: 陈彪

Production and Characterization of an Antiserum Against Human α-synuclein

Liu Xuemei¹, Yu Shun¹, Li Yaohua¹, Zhou Ming¹, Zuo Xiaohong¹, Lü Guowei², Cheng Biao¹

1. Beijing Geriatric Clinical and Research Center, Xuanwu Hospital, Affiliate of Capital University of Medical Sciences;2. Department of Neurobiology,Capital University of Medical Sciences

Received:2002-10-11 Revised:1900-01-01 Online:2003-01-15 Published:2003-01-15

摘要/Abstract

摘要： 制备特异性抗人α-synuclein抗血清,用于α-synuclein相关退行性疾病及病理状态的研究。用重组人α-synuclein免疫BALB/C小鼠,Dotblot、Westernblot及免疫组化法鉴定所获抗血清。Dotblot显示该抗血清可识别高于50ng的重组α-synuclein.Westernblot分析表明此抗血清可识别人及大鼠脑匀浆中相对分子质量为1.8万的蛋白质,与以往报道α-synuclein的相对分子质量一致。免疫组化染色显示α-synuclein免疫活性物质广泛分布于皮质、海马、纹状体、杏仁核和嗅球,主要集中于神经元核周胞质及神经末梢。提示:所制备的抗血清可特异性识别人及大鼠脑中的α-synuclein,该抗体对α-synuclein相关疾病的研究具有应用价值。

关键词: α-synuclein, 抗体, 神经元

Abstract: To develop an antiserum specific to human α-synuclein for the study of α-synuclein related neurodegenerative diseases and pathological conditions, BALB/C mice were immunized with recombinant human α-synuclein. The antiserum was characterized by Dot blot, Western blot and immunohistochemistry. Dot blot showed that the antiserum could detect human recombinant α-synuclein at concentration 52ng. Western blot analysis revealed that the antiserum could recognize a 18000 protein from human and rat brain homogenates, which was consistent with the reported molecular weight of the protein. Immunohistochemical staining with the antiserum showed that α-synuclein immunoreactivity was mainly distributed in cortex, hippocampus, striatum, amygdala and olfactory bulb, and was concentrated in the nerve terminals and cytoplasms near the nuclear envelopes of neurons. The antiserum can specifically recognize the α-synucleins in human and rat brains and can be used in α-synuclein related diseases.

Key words: synuclein, antibody, neuron

中图分类号:

R741.02
Q426

刘雪梅;于顺;李尧华;周茗;左晓红;吕国蔚;陈彪. 抗人α-synuclein多克隆抗体的制备和鉴定[J]. 首都医科大学学报, 2003, 24(1): 7-10.

Liu Xuemei;Yu Shun;Li Yaohua;Zhou Ming;Zuo Xiaohong;Lü Guowei;Cheng Biao. Production and Characterization of an Antiserum Against Human α-synuclein[J]. Journal of Capital Medical University, 2003, 24(1): 7-10.

[1]	王华, 史婷婷, 信中, 华琳, 李聪, 曹秋梅. Graves病患者促甲状腺素受体抗体与肠道菌群及短链脂肪酸的相关性[J]. 首都医科大学学报, 2022, 43(6): 931-939.
[2]	刘春涛, 苏珈仪, 旦增卓嘎, 伊比然恨, 卓玛, 张澍田. 西藏自治区藏族人群幽门螺杆菌毒力菌株分型与慢性胃炎及消化性溃疡的相关性研究[J]. 首都医科大学学报, 2022, 43(3): 463-468.
[3]	苏珈仪, 刘春涛, 王铁山, 李文坤, 杨奕, 武珊珊, 李鹏, 吴静. 血清幽门螺杆菌抗体分型检测与胃黏膜病变的相关性[J]. 首都医科大学学报, 2022, 43(2): 216-220.
[4]	王莉, 张国军. 血清神经元特异性烯醇化酶与外伤性脑损伤患者及临床特征的关系[J]. 首都医科大学学报, 2021, 42(5): 715-720.
[5]	迟博闻, 王佳伟. 单纯疱疹病毒感染后自身免疫性脑炎的研究进展[J]. 首都医科大学学报, 2021, 42(3): 341-346.
[6]	马登磊, 张旭, 张丽, 李雅莉, 张兰, 李林. 山茱萸环烯醚萜苷对创伤性脑损伤大鼠认知功能及tau蛋白磷酸化的影响[J]. 首都医科大学学报, 2020, 41(3): 397-402.
[7]	杨田丽, 杨勇飞, 袁增强. HT22细胞系铁死亡敏感性研究[J]. 首都医科大学学报, 2020, 41(1): 87-91.
[8]	李文雪, 刘芳, 朱家安, 刘芳, 陈征, 李殿城. 抗环瓜氨酸肽抗体与超声检出的类风湿性关节炎骨侵蚀的相关性研究[J]. 首都医科大学学报, 2019, 40(6): 829-832.
[9]	李杰, 谢秀娟, 宋炜, 潘维花, 杨巍巍, 于顺. 帕金森病患者血浆增强α-突触核蛋白细胞毒性及其机制研究[J]. 首都医科大学学报, 2019, 40(2): 244-250.
[10]	边经纬, 尹晓辰, 李浩, 张苏丽, 王美丽, 刘慧荣. 血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体阳性雌鼠孕后出现妊娠期高血压样症状[J]. 首都医科大学学报, 2019, 40(2): 257-262.
[11]	曹立雪. 驯服进化的力量:酶和结合蛋白的定向进化及噬菌体展示技术——2018年诺贝尔化学奖简介[J]. 首都医科大学学报, 2018, 39(5): 770-777.
[12]	童峰, 李磊, 赵涛, 李晓峰, 刘迎龙. 小儿主动脉缩窄围术期泛素羧基末端水解酶L1的变化与临床意义[J]. 首都医科大学学报, 2018, 39(3): 444-448.
[13]	陈荣卷, 陈其瑞, 许江南, 丁跃中. 阻断CD40-CD40L信号通路对小鼠肺移植术后闭塞性细支气管炎的影响[J]. 首都医科大学学报, 2018, 39(2): 258-264.
[14]	杨军, 王敏, 张罗. 细胞因子和免疫球蛋白抗体在过敏性鼻炎小鼠早期无症状阶段和晚期有症状阶段表达的差异[J]. 首都医科大学学报, 2018, 39(1): 63-68.
[15]	卢勇泉, 陈敏, 高歌, 段春礼, 鲁玲玲, 杨慧. TRPC3参与α-突触核蛋白引起的线粒体损伤[J]. 首都医科大学学报, 2017, 38(6): 857-862.