抗人α-synuclein多克隆抗体的制备和鉴定

首都医科大学学报 ›› 2003, Vol. 24 ›› Issue (1): 7-10.

抗人α-synuclein多克隆抗体的制备和鉴定

刘雪梅¹, 于顺¹, 李尧华¹, 周茗¹, 左晓红¹, 吕国蔚², 陈彪¹

1. 首都医科大学宣武医院老年病研究中心;2. 首都医科大学神经生物学系

收稿日期:2002-10-11 修回日期:1900-01-01 出版日期:2003-01-15 发布日期:2003-01-15
通讯作者: 陈彪

Production and Characterization of an Antiserum Against Human α-synuclein

Liu Xuemei¹, Yu Shun¹, Li Yaohua¹, Zhou Ming¹, Zuo Xiaohong¹, Lü Guowei², Cheng Biao¹

1. Beijing Geriatric Clinical and Research Center, Xuanwu Hospital, Affiliate of Capital University of Medical Sciences;2. Department of Neurobiology,Capital University of Medical Sciences

Received:2002-10-11 Revised:1900-01-01 Online:2003-01-15 Published:2003-01-15

摘要/Abstract

摘要： 制备特异性抗人α-synuclein抗血清,用于α-synuclein相关退行性疾病及病理状态的研究。用重组人α-synuclein免疫BALB/C小鼠,Dotblot、Westernblot及免疫组化法鉴定所获抗血清。Dotblot显示该抗血清可识别高于50ng的重组α-synuclein.Westernblot分析表明此抗血清可识别人及大鼠脑匀浆中相对分子质量为1.8万的蛋白质,与以往报道α-synuclein的相对分子质量一致。免疫组化染色显示α-synuclein免疫活性物质广泛分布于皮质、海马、纹状体、杏仁核和嗅球,主要集中于神经元核周胞质及神经末梢。提示:所制备的抗血清可特异性识别人及大鼠脑中的α-synuclein,该抗体对α-synuclein相关疾病的研究具有应用价值。

关键词: α-synuclein, 抗体, 神经元

Abstract: To develop an antiserum specific to human α-synuclein for the study of α-synuclein related neurodegenerative diseases and pathological conditions, BALB/C mice were immunized with recombinant human α-synuclein. The antiserum was characterized by Dot blot, Western blot and immunohistochemistry. Dot blot showed that the antiserum could detect human recombinant α-synuclein at concentration 52ng. Western blot analysis revealed that the antiserum could recognize a 18000 protein from human and rat brain homogenates, which was consistent with the reported molecular weight of the protein. Immunohistochemical staining with the antiserum showed that α-synuclein immunoreactivity was mainly distributed in cortex, hippocampus, striatum, amygdala and olfactory bulb, and was concentrated in the nerve terminals and cytoplasms near the nuclear envelopes of neurons. The antiserum can specifically recognize the α-synucleins in human and rat brains and can be used in α-synuclein related diseases.

Key words: synuclein, antibody, neuron

中图分类号:

R741.02
Q426

刘雪梅;于顺;李尧华;周茗;左晓红;吕国蔚;陈彪. 抗人α-synuclein多克隆抗体的制备和鉴定[J]. 首都医科大学学报, 2003, 24(1): 7-10.

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