PCR诊断细菌性痢疾的临床价值

首都医科大学学报 ›› 2006, Vol. 27 ›› Issue (2): 171-175.

PCR诊断细菌性痢疾的临床价值

温艳, 阴赪宏, 黄敏君, 栗绍刚, 李威, 王非

首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所

收稿日期:2006-02-28 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-04-24 发布日期:2006-04-24
通讯作者: 阴赪宏

Development of the Multiplex PCR to Detect the Invasion Associated Genes of Shigella

Wen Yan, Yin Chenghong, Huang Minjun, Li Shaogang, Li Wei, Wang Fei

Beijing Friendship Hospital, Capital University of Medical Sciences, Beijing Institute for Tropical Medicine

Received:2006-02-28 Revised:1900-01-01 Online:2006-04-24 Published:2006-04-24

摘要/Abstract

摘要： 目的建立一种快速、特异、敏感的诊断方法,对痢疾杆菌的致病基因进行基因检测研究.方法分别用PCR和多重聚合酶链反应(multiplex PCR)诊断方法,扩增2种痢疾杆菌的致病基因(ial、ipaH基因),扩增产物经电泳,出现与已知扩增片段大小一致的条带,并经测序与GENE库中标准菌株比较序列相同,即判断为该标本志贺菌的ial、ipaH基因阳性.结果对1组常规培养生化检测后的40份腹泻患者标本进行ial、ipaH基因特异片段扩增,ipaH基因阳性率为75%,ial基因阳性率为35%,ial、ipaH基因双基因阳性率为35%,较常规培养生化检测志贺菌阳性率(7.5%)高4倍多,ial、ipaH基因双基因阴性率为25%.结论 PCR检测痢疾杆菌的致病基因具有简便、快速、特异、敏感和不需培养等特点,适于临床应用.

关键词: 腹泻, 聚合酶链反应, 痢疾

Abstract: Objective To establish a speed convenient and susceptive diagnosed method by detecting the invasion associated genes of shigella.Methods PCR and multiplex PCR was used to detect the pathogenic genes,ipaH and ial with the same time at one PCR reaction.Amplified DNA products of interest were sequenced,then the resulting was analyzed by use of the BLAST suite of programs.The sequences identified in the present databases available over the Internet were subsequently aligned.Results All 40 isolates from diarrhea stools were 14 positive for both ipaH and ial.Comparing with the routine methods the positive rate of the multiplex-PCR is high more than 4 times.Conclusion The method of PCR to detect the invasion associated genes of shigella is simple,special,sensitive,quickly and saving time.This new method can be widely used to clinic.

Key words: diarrhea, multiplex PCR, shigella

中图分类号:

R516.4

温艳;阴赪宏;黄敏君;栗绍刚;李威;王非. PCR诊断细菌性痢疾的临床价值[J]. 首都医科大学学报, 2006, 27(2): 171-175.

Wen Yan;Yin Chenghong;Huang Minjun;Li Shaogang;Li Wei;Wang Fei. Development of the Multiplex PCR to Detect the Invasion Associated Genes of Shigella[J]. Journal of Capital Medical University, 2006, 27(2): 171-175.

[1]	冯冉, 甄国新, 李颖, 张爽, 冀国强, 高彭, 马红梅. 2013-2018年北京市顺义区哨点医院腹泻病例中致泻性大肠埃希菌流行特征分析[J]. 首都医科大学学报, 2020, 41(6): 991-996.
[2]	方芳, 陈柯霖, 陈燕, 黄泽玉, 吕虹, 刘淑静, 周金, 张国军, 康熙雄. 应用CNAS CL-36标准评估HBV DNA定量检测试剂的抗干扰能力[J]. 首都医科大学学报, 2016, 37(4): 495-499.
[3]	张声生, 杨成. 痛泻要方对D-IBS结肠黏膜5-HT及CGA相关离子通道转运机制的研究[J]. 首都医科大学学报, 2015, 36(4): 645-648.
[4]	薛奋勤, 许晴, 魏华, 李华, 薛冰. 仅采用PCR进行分子克隆的方法探索[J]. 首都医科大学学报, 2014, 35(6): 785-789.
[5]	吕虹;高志勇;张国军;闫惠平;康熙雄. 诺如病毒性胃肠炎快速检测方法的研究[J]. 首都医科大学学报, 2012, 33(2): 148-152.
[6]	向绍通;徐书雯;李东风. 迟发性阿尔茨海默病患者血清尿激酶型纤溶酶原激活因子浓度的测定及其意义[J]. 首都医科大学学报, 2012, 33(1): 103-106.
[7]	孙秀静;朱圣韬;徐有青;张澍田. SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测人c-myc基因方法的建立[J]. 首都医科大学学报, 2009, 30(6): 821-826.
[8]	张声生;许文君;陈贞;陈誩. 基于随证加减的疏肝健脾法治疗腹泻型肠易激综合征近期和中期疗效评价[J]. 首都医科大学学报, 2009, 30(4): 436-440.
[9]	向绍通;徐书雯;李东风. 尿激酶型纤溶酶原激活因子基因P141L多态性与迟发性阿尔茨海默病的关系[J]. 首都医科大学学报, 2008, 29(3): 278-282.
[10]	金建敏;张沪生;陈东宁. 嗜肺军团菌与非嗜肺军团菌所致社区获得性肺炎的临床对比分析[J]. 首都医科大学学报, 2008, 29(3): 348-353.
[11]	季秀娟;徐剑;张雪莲;郭丽敏;杨金奎. 血管紧张素转化酶相关性羧肽酶在人及啮齿动物胰腺的表达[J]. 首都医科大学学报, 2007, 28(3): 278-282.
[12]	石琳;申阿东;李晓峰;柏松;关晓蕾;李仲智. 中国先天性心脏病Nkx2.5基因突变筛查及关联研究[J]. 首都医科大学学报, 2005, 26(5): 525-528.
[13]	樊剑锋;杨永弘;马琳;佟月娟. 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗生素耐药和耐药基因的检测[J]. 首都医科大学学报, 2005, 26(5): 540-544.
[14]	周兵;张伟;孙文艳;陶格陶呼;杨凌. 用PCR法检测真菌性鼻窦炎分泌物中的真菌[J]. 首都医科大学学报, 2005, 26(3): 249-251.
[15]	褚金花;宣登峰;吴萍;张淑华;李国君;耿荣. 线粒体直接PCR扩增法[J]. 首都医科大学学报, 2004, 25(3): 284-285.