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2012年 第33卷 第2期    刊出日期：2012-04-21

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2012年4月 第33卷 第2期目 次

2012, 33(2):  0-0. 

摘要 ( 461 )   PDF (1101KB) ( 266 )  

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学系简介

首都医科大学临床检验诊断学系

2012, 33(2):  0-0. 

摘要 ( 455 )   PDF (1481KB) ( 238 )  

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2005年，首都医科大学以“国家生命科学与技术人才培养基地”为依托，以附属北京天坛医院为核心，整合学校各附属、教学医院的相同学科资源成立了首都医科大学临床检验诊断学系，进一步搭建起临床检验诊断学高级专门人才培养平台，以追求学科学术水平不断提高为主要目标，全面提升临床检验诊断学学科的核心竞争力。学系现在为北京市教委重点学科，是北京市临床检验诊断学唯一重点学科。

体外诊断专题

血清CXCL16浓度与脑卒中患者颈动脉粥样硬化的相关性研究

王克迪;刘志忠;王瑞珉;康熙雄

2012, 33(2):  139-142.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.001

摘要 ( 1064 )   PDF (1007KB) ( 289 )  

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目的 探讨血清CXCL16浓度与脑卒中患者颈动脉粥样硬化的关系。方法 对135名急性动脉粥样硬化性脑卒中患者行颈部血管超声检查,根据颈动脉内-中膜厚度(intima-median thickness,IMT)分为IMT增厚组和IMT正常组;根据斑块情况分为无斑块组、稳定斑块组和不稳定斑块组;根据斑块面积(carotid plaque area,CPA)四分位数间距分为4组,同时应用ELISA方法检测其血清CXCL16浓度,并进行组间比较。结果 血清CXCL16浓度与IMT增厚、不稳定斑块和高CPA密切相关,Logistic回归结果显示高血清CXCL16浓度是IMT增厚、不稳定斑块和高CPA的独立危险因素(P=0.021,P=0.003,P=0.005)。结论 CXCL16是脑卒中患者颈动脉粥样硬化的独立危险因素,检测血清CXCL16浓度可能成为发现早期动脉硬化的方法。

神经内外科脑脊液标本细菌流行病学分布和耐药性分析

荆楠;唐明忠;刘志忠;康熙雄

2012, 33(2):  143-147.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.002

摘要 ( 990 )   PDF (1014KB) ( 525 )  

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目的 监测并比较神经内外科脑脊液标本培养阳性的细菌流行病学分布及耐药状况,以期对临床抗菌药物治疗提供依据。方法 对送检脑脊液标本进行细菌培养、鉴定及抗菌药物敏感(简称药敏)试验,比较病原菌分布和药敏结果。结果 1)细菌构成比比较:革兰阳性菌(G⁺菌)在神经外科中的比例(67.2%)高于神经内科(56.1%),铜绿假单胞菌在神经内科革兰阴性菌(G^-菌)中所占比例(20.4%)高于神经外科(6.7%),鲍曼不动杆菌在神经外科G^-菌中的比例(37.8%)高于神经内科(22.4%)。2)细菌药敏:G⁺菌对万古霉素、利奈唑胺敏感率高, G^-菌对亚胺培南、阿米卡星敏感。神经外科铜绿假单胞菌比神经内科对环丙沙星的敏感率更高。神经外科表皮葡萄球菌对利福平更敏感。结论 神经内外科中枢神经系统感染多为院内感染,以革兰阳性菌为主。监测并比较颅内感染病原菌分布及药敏情况,可为神经内外科颅内感染的预防和经验性抗菌药物治疗提供可靠数据资料。

诺如病毒性胃肠炎快速检测方法的研究

吕虹;高志勇;张国军;闫惠平;康熙雄

2012, 33(2):  148-152.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.003

摘要 ( 1021 )   PDF (1315KB) ( 299 )  

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目的 探讨反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、转录反转录协同实验(transcription reverse concerted,TRC)在诺如病毒(norovirus,NVs)性胃肠炎检测中的应用,为NVs检测提供更快捷的检测方法。方法 收集2007年2月~2007年3月北京地区各医院及各区疾控中心病毒性胃肠炎患者粪便样本364例,分别采用RT-PCR方法和TRC方法进行NVs核酸检测,并以RT-PCR方法为标准对TRC方法进行评价,计算其灵敏度、特异性等指标;通过一致性Kappa检验,评价两种方法的一致性。结果 应用TRC方法检测364例病毒性胃肠炎患者粪便样本,NVs检测总阳性率为43.96%(160/364);其中,NVs Ⅰ型(genegroup Ⅰ,GGⅠ)阳性率3.85%(14/364),NVs Ⅱ型(genegroup Ⅱ,GGⅡ)阳性率40.11%(146/364);在阳性样本中,78.58%的NVs GGⅠ和89.73%的NVs GGI在20min内检出,明显缩短了检出时间。其中男女两组差异无统计学意义(χ²=0.465,P=0.495)。按年龄分组,其中阳性率最高的为50~59岁组,其阳性率为63.63%,阳性率最低的为10~19岁组,其阳性率为18.93%,通过χ²检验,除10~19岁组检出率低于各组外,其余各组间检验结果差异无统计学意义。结论 与RT-PCR方法相比,TRC方法检测NVs敏感度高、特异性强,操作简便易行,适用性强。

细菌16SrRNA基因PCR诊断细菌性阴道病的研究

吕治;彭国丽;苏建荣

2012, 33(2):  153-157.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.004

摘要 ( 1257 )   PDF (1275KB) ( 421 )  

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目的 确定阴道主要角色菌的分离率与细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)的关系,建立BV的分子诊断方法。方法采用临床Amsel标准筛选91例BV患者、82例健康对照妇女。采集阴道分泌物标本提取细菌基因组DNA,采用细菌特异性16SrRNA基因PCR检测标本中的卷曲乳酸杆菌、阴道加德纳菌、人型支原体等11种角色菌。比较上述细菌分离率与BV发生的关系。通过统计学分析建立最佳的用于BV诊断细菌检测组合。结果 与BV密切相关的阴道细菌有纤毛菌属、阴道阿托波菌属、巨球菌属、羞怯动弯杆菌属、普雷沃菌属。上述细菌的分离率在2组样本的差异具有统计学意义(P<0.01)。以联合检测阴道阿托波菌属、纤毛菌属、普雷沃菌属作为BV的判断标准时,敏感性为93.41%,特异性为78.05%。结论 BV为多种微生物混合感染性疾病,通过PCR方法检测主要致病菌或致病菌组合,可以有效地对BV进行快速分子诊断。

UF-1000i尿沉渣分析仪假阳性结果分析

刘常军;刘婷;董矜;姜辉;田亚平

2012, 33(2):  158-160.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.005

摘要 ( 994 )   PDF (997KB) ( 628 )  

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目的 通过对UF-1000i尿沉渣分析仪假阳性结果进行分析,获得实验室工作中排除假阳性检测的经验和方法。方法 采用抽签法随机收取住院患者晨尿样本500份,同时进行UF-1000i尿液沉渣流式自动分析仪(简称UF-1000i)、干化学和显微镜检测(镜检)。UF-1000i检测异常者为阳性,其中UF-1000i检测异常而干化学和镜检正常者为假阳性,将2者检测的有形成分结果进行分析。结果 500份样本中,有178份阳性样本,其中有20份样本UF-1000i的主要检测项目均出现假阳性,其中红细胞(erythrocyte,RBC)、白细胞(leukocyte,WBC)、管型、上皮细胞(epithelial cells,EC)的假阳性率分别为10.8%、8.2%、23.1%、14.3%。结论 UF-1000i尿沉渣分析仪提高了尿液分析的过筛检查实验室检测效率,但对其阳性结果还需密切注意,应该避免假阳性结果。

肠球菌GyrA基因突变和多重耐药泵与氟喹诺酮耐药性关系研究

闫东辉;许淑珍;苏建荣

2012, 33(2):  161-164.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.006

摘要 ( 902 )   PDF (1173KB) ( 310 )  

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目的 探究肠球菌GyrA基因突变和多重耐药泵与氟喹诺酮类药物耐药性的关系。方法 全部试验菌株使用VITEK 2-Compact仪器和GPI卡进行鉴定。通过PCR和单链构象多态性(SSCP)法检测对左氧氟沙星(Levo)与环丙沙星(Cip)耐药的30株粪肠球菌和10株屎肠球菌GyrA基因有无碱基发生突变,并通过基因测序确定其突变类型。检测了30株粪肠球菌在M-H琼脂中加入终浓度为20 μg/mL利血平后Cip MIC值的改变。结果 PCR-SSCP分析结果表明40株对Levo和Cip同时耐药肠球菌均扩增出GyrA基因,其中有24株粪肠球菌和4株屎肠球菌的单链泳动带与粪肠球菌ATCC 29212和敏感菌株的单链泳动带相比较出现异常。其中粪肠球菌在第87位上有密码子改变:GAA变为GGA;屎肠球菌在第83位有密码子改变:AGT变为TAT,这些突变均可引起氨基酸的改变。在M-H琼脂中加入利血平可以提高部分粪肠球菌对环丙沙星的敏感性。结论 用PCR-SSCP法检测40株肠球菌的GyrA基因并通过测序分析,显示有70%(28株)肠球菌碱基发生了突变,说明GyrA基因喹诺酮类药物耐药决定区(QRDR)突变是肠球菌对氟喹诺酮类药物耐药的重要原因,此外还有药物泵出等耐药机制的存在。

探讨γ-谷氨酰基转移酶冰冻混合人血清候选标准物质的制备和稳定性

徐静;张建平;王清涛

2012, 33(2):  165-168.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.007

摘要 ( 829 )   PDF (1319KB) ( 328 )  

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目的 探讨γ-谷氨酰基转移酶(gamma-glutamyltransferase,GGT)冰冻混合人血清候选标准物质制备方法的可行性,同时观察并分析其在-80 ℃保存的稳定性。方法 对收集的GGT血清按5个浓度水平进行混合过滤分装,同时分别在0、7、30、60、120、180、330、360、390、750 d测定GGT冰冻混合人血清候选标准物质,采用线性回归方差分析对测定结果进行稳定性检验,评价其稳定性。结果 在750 d以内,C1~C5线性回归方差分析的P值均>0.05(C1~C5测定结果P值分别为0.886,0.753,0.585,0.571,0.945)。结论 本实验室采用的GGT冰冻混合人血清候选标准物质制备方法简便易行,且候选人血清标准物质在750 d内稳定性良好。

抗念珠菌药物的耐药特性分析

曾昭瑛;苏建荣

2012, 33(2):  169-176.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.008

摘要 ( 1147 )   PDF (1047KB) ( 1037 )  

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真菌侵袭性感染日益增多,抗真菌药大量应用导致念珠菌耐药菌株相继出现。本文旨在介绍抗念珠菌药物的特点、药物敏感性试验方法和要求、国内外耐药现状及念珠菌感染治疗选药推荐等内容。

Toll样受体与自身免疫性疾病关系的研究进展

马瑞敏;张国军;康熙雄

2012, 33(2):  177-181.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.009

摘要 ( 1306 )   PDF (1018KB) ( 1313 )  

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Toll样受体(Toll like receptors,TLRs)是一类跨膜受体,主要表达于抗原提呈细胞及一些上皮细胞,通过识别特异性配体来激活免疫反应。除外源性配体外,TLRs还可识别一些内源性分子,信号的过度活化则可导致自身免疫性疾病。本文综述了TLRs的种类及配体、相应的信号通路及功能调节,重点介绍了TLRs在一些自身免疫性疾病中的研究现状,最后探讨了TLRs在自身免疫性疾病治疗中的作用。

基础研究

抑制低氧诱导因子-1α对PC12细胞存活的影响

李冉;王勇;宫晓丽;范明;王晓民;朱玲玲;汪璇

2012, 33(2):  182-186.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.010

摘要 ( 970 )   PDF (2279KB) ( 359 )  

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目的 通过抑制低氧诱导因子-1α转录活性,研究低氧诱导因子-1α在低氧诱导的细胞死亡中的作用。方法 1 将PC12细胞接种于12孔板,在20%常氧和3%低氧环境中培养24 h,在光镜下拍照并应用计数方法记录PC12细胞的生长情况。2 将PC12细胞接种于96孔板,在常氧和低氧环境中培养24 h后,用细胞活力检测剂(a novel tetrazolium compound, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium inner salt,MTS)检测PC12细胞的生长情况。3 在常氧和低氧条件下分别用5 nmol/L、50 nmol/L、500 nmol/L的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24 h和48 h后,用MTS法检测细胞活力。结果 1 细胞计数和MTS法检测细胞活力的结果均显示3%的低氧条件可明显诱导PC12细胞死亡。2 不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞24 h之后,低氧和常氧的细胞活力没有显著区别。3 不同浓度的低氧诱导因子-1α抑制剂棘霉素处理PC12细胞48 h之后,低氧不再促进细胞死亡,相反,低氧条件处理的细胞活力明显好于常氧。结论 低氧会促使PC12细胞死亡,棘霉素抑制HIF-1α的转录活性24 h后,低氧对PC12细胞的促死亡作用减弱;48 h后,低氧组的细胞活力还可超过常氧组。这表明,低氧下过量的HIF-1α转录激活对细胞是有害的。

Bβ448野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系的建立

林媛;李积凤;刘杰;牛梦林;孙然;王军;刘岩;王辰;

2012, 33(2):  187-192.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.011

摘要 ( 886 )   PDF (1855KB) ( 287 )  

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目的 构建野生型(BβArg448)和突变型(BβLys448)纤维蛋白原稳定表达细胞系,为进一步研究BβArg448Lys基因多态性的病理生理学意义及相关蛋白功能研究提供实验基础。方法 以含纤维蛋白原野生型Bβ链cDNA全长的表达载体pMLP-FGB(448G)为模板,采用PCR定点突变技术构建BβLys448表达载体,即突变型质粒pMLP-FGB(448A)。应用脂质体转染及药物加压筛选的方法,将纤维蛋白原Aα链、野生型/突变型Bβ链、γ链表达载体共同转染至CHO-K1细胞,RT-PCR检测各条链mRNA的表达。结果 野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系在转录水平构建成功。结论 野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞等在转录水平构建成功,为进一步体外研究BβArg448Lys所致纤维蛋白原的结构与功能异常奠定了基础。

β₂肾上腺能受体与黏蛋白2在大鼠结肠黏膜的共存

李晓峰;张悦;李蕴;朱进霞

2012, 33(2):  193-197.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.012

摘要 ( 928 )   PDF (3433KB) ( 374 )  

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目的 探究去甲肾上腺素对大鼠结肠黏液分泌的影响以及肾上腺能β受体在大鼠结肠黏膜的分布。方法 采用酶联免疫吸附测定法检测去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对结肠黏液分泌的影响;用免疫荧光组织化学方法观察黏蛋白2(mucin2,MUC2)及β肾上腺能受体在结肠黏膜的分布;实时定量PCR方法检测β肾上腺能受体在大肠结肠黏膜的表达;同时采用阿利新蓝/过碘酸雪夫染色方法检测黏液细胞在结肠黏膜的分布;使用激光共聚焦显微镜观察β₂肾上腺能受体与MUC2在结肠黏液细胞的共存。结果 去甲肾上腺素可刺激大鼠远端结肠黏膜的黏液释放增加,比对照组增加约247%。免疫荧光组织化学结果显示β₁和β₃肾上腺能受体在结肠黏膜有弱表达,β₂肾上腺能受体为高表达。β₁ 和β₂肾上腺能受体mRNA表达相对量与免疫荧光组织化学一致。黏蛋白MUC2主要表达在结肠隐窝的黏液细胞内,且与β₂肾上腺能受体有共存。结论 β₂肾上腺能受体与MUC2在结肠黏液细胞共存;去甲肾上腺素可促进结肠黏液分泌。

过表达apoA-Ⅰ对BEL-7402细胞内脂质堆积的影响

覃岭;王宇童

2012, 33(2):  198-204.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.013

摘要 ( 849 )   PDF (3303KB) ( 432 )  

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目的 通过建立过表达载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,apoA-Ⅰ)的细胞模型,用不同浓度及不同类型的脂肪酸作用于细胞,检测过表达apoA-Ⅰ与正常细胞内脂质水平,来研究利用过表达apoA-Ⅰ促进ATP结合盒转运子A1 (ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)介导的脂质转运途径,降低脂质合成,进而影响非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH) 细胞的脂质堆积的分子机制,探索一种新方法,通过apoA-Ⅰ/ABCA1这一途径改变细胞内脂质代谢来预防NASH。方法1 通过不同浓度和类型的脂肪酸处理人肝癌细胞系BEL-7402细胞,作用6、12、24 h后,经油红O染色,检测不同时间脂质在细胞内的定位,从而确定出适合的脂肪酸浓度及作用时间;2 通过MTT法检测不同浓度及类型的脂肪酸作用细胞6、12、24 h后,细胞活性的变化情况;3 分别转染空载体质粒pcDNA 3.0与质粒pcDNA3.0/apoA-Ⅰ,通过Western blotting的实验方法,检测细胞内、外apoA-Ⅰ的表达情况;4 对正常或过表达apoA-Ⅰ的BEL-7402细胞模型,以最适的实验条件作用于正常(对照组)和过表达apoA-Ⅰ(实验组)的BEL-7402细胞,检测细胞内胆固醇、游离脂肪酸以及三酰甘油的含量。结果 1 200 μmol/L或400 μmol/L浓度脂肪酸作用6、12及24 h均可使脂质在BEL-7402细胞胞质中堆积,脂质的产生对脂肪酸呈剂量和时间依赖性;2 饱和脂肪酸棕榈酸使细胞活性降低,且对细胞生长的抑制作用随棕榈酸的浓度及作用时间的增加而加强;3 apoA-Ⅰ过表达于BEL-7402细胞内,且apoA-Ⅰ可以释放到细胞外,协助ABCA1转运胆固醇;4 与正常的BEL-7402细胞相比,过表达apoA-Ⅰ组细胞内的三酰甘油、游离脂肪酸以及胆固醇均有显著减少。结论 与正常组相比,过表达apoA-Ⅰ可以减少胆固醇、游离脂肪酸及三酰甘油在人肝细胞内的聚积,从而对于NASH的防治具有治疗作用。

单侧睁眼闭眼引起的全脑脑电图差异研究

王坤;崔维棋;李国珍;陈昭燃

2012, 33(2):  205-208.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.014

摘要 ( 989 )   PDF (2148KB) ( 1239 )  

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目的 脑电图(electroencephalogram,EEG)是通过脑电描记仪将脑自身微弱的生物电放大记录成为一种脑电谱图,以帮助诊断疾病的一种现代辅助检查方法。早期对闭眼和睁眼差异的研究结果多集中在位于枕叶-顶叶的α波的幅度的变化,闭眼幅度大于睁眼。本文主要探讨单侧眼睛(左眼和右眼)分别睁开和闭合时所引起的七波段脑电图谱:Delta(0.5~3.5 Hz),Theta(4~7 Hz),Alpha-1(7.5~9.5 Hz),Alpha-2(10~12 Hz),Beta-1(13~23 Hz),Beta-2(24~34 Hz) and Gamma(35~45 Hz)的差异。方法 受试者为15名健康男性(年龄19~27岁),静息状态下,在安静舒适的室内环境中,将随机单侧睁眼闭眼(左开/左闭,右开/右闭)作为刺激,采用电脑自动记录七波段脑电图(128-导EEG)。结果 静息状态下的脑电区域能量:中间频率波段alpha-1与alpha-2闭眼时明显高于睁眼时(alpha-1,P=0.038;alpha-2,P=0.02),而比较单侧睁眼闭眼alpha-1与alpha-2时,差异无统计学意义(alpha-1,P=0.502;alpha-2,P=0.984),其他波段差异无统计学意义。结论 闭眼情况下α波功率显著高于睁眼,而在比较七波段单侧眼睛睁闭时,差异无统计学意义,说明单侧外界光线刺激引起的对侧大脑半球及视觉皮质的变化,经过视交叉传入,胼胝体整合两边的头脑反应是一种持续性变化(2 min),从而使两侧EEG区域能量图一致。

重组人内皮抑素的大鼠药代动力学研究

蔡永明;曾勇;姜凌;张骏;刘昌孝;张宗鹏;

2012, 33(2):  209-213.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.015

摘要 ( 1334 )   PDF (2163KB) ( 1034 )  

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目的 研究大鼠静脉注射重组人内皮抑素(recombinant human endostatin,rhEndostatin)药代动力学、组织分布及排泄。方法 采用¹²⁵I标记rhEndostatin示踪法,测定生物样品总放射性(radioactivity,RA法)和三氯醋酸沉淀蛋白后的放射性(trichloroacetic acid-radioactivity,TCA-RA法)以研究药物代谢过程。结果 大鼠静脉注射rhEndostatin 5、10和20 mg/kg后,血药浓度和药物时间曲线下面积(area under the serum concentration-time curve,AUC)均随剂量增加而增大;TCA-RA法测定3个剂量的平均消除半衰期(elimination half-life,t_1/2β)和平均清除率(systemic clearance,CL)变化不大,t_1/2β为(243~265 min)、CL为(2.4~2.6 mL·kg^-1·min^-1)。大鼠静脉注射rhEndostatin 10 mg/kg后,以肾脏含药量最高,脑、肌肉和脂肪的含药量最低。96 h内由尿累积排泄量占给药总量的86.9%,粪中可回收到给药量的5.8%,尿和粪的总回收率达到92.7%;24 h内由胆汁排出的药量占给药量的1.3%。结论 大鼠静脉注射rhEndostatin不同剂量后,药物消除基本符合线性动力学特征;组织分布呈特异性靶向分布(以肾脏含药量最高),也基本反映了rhEndostatin主要经肾由尿排泄的途径消除。

慢性丙型肝炎患者DNT细胞及T细胞亚群的研究

梁骑;焦艳梅;计云霞;李田;吴昊;张国元;唐中

2012, 33(2):  214-217.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.016

摘要 ( 1145 )   PDF (2316KB) ( 327 )  

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目的 探讨外周血中CD3⁺CD4^-CD8^-(double negative T,DNT)细胞及T淋巴细胞亚群在慢性丙型肝炎(chronic hepatitis C,CHC)患者中的表达及意义。方法 利用流式细胞仪对92例CHC患者、93例正常健康人外周血中的DNT细胞及T细胞亚群进行检测,并对比分析两者的差异。结果 CHC患者DNT细胞百分比(8.57%±6.16%)高于正常对照组(6.78%±4.50%)(P<0.05),其绝对数在两者间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CHC患者CD4⁺%,CD4⁺/ CD8⁺比值低于正常对照组(P值均<0.001),CD8⁺%高于正常对照组(P<0.001)。结论 CHC患者DNT细胞百分比显著升高及T淋巴细胞亚群比例改变,可能是丙型肝炎病毒感染慢性化的重要原因之一。

北京市老年人膳食结构及代谢状况八年变迁研究

王玮;汤哲;李霞;高琦;孙菲;刁丽君;郭秀花

2012, 33(2):  218-222.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.017

摘要 ( 909 )   PDF (1025KB) ( 333 )  

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目的 探讨北京市老年人膳食结构及代谢状况在1992年和2000年的变化情况。方法 选取北京老龄化纵向研究中在1992年和2000年均完成血生化检查的698人,提取其生化检查、膳食调查等相关信息,采用潜在类别分析技术提取其在1992年时的膳食结构,根据膳食频率对膳食结构的类别进行命名。保持膳食结构分类不变对老年人在2000年的膳食特点进行描述,对代谢指标变化进行差异性检验。结果 可将北京市老年人按照膳食结构分为三型:营养充足型(314人,45.0%),中间型(259人,37.1%)和主食肉类为主型(125人,17.9%)。以上研究对象除舒张压、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白外,各组生化指标在2000年的水平均高于其在1992年的相应指标。结论 不同膳食结构的老年人八年后膳食习惯和代谢指标的变化量不同,但确认关联性需要进一步进行加入时间依从协变量的多因素分析以排除混杂因素。

c-Met在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理的相关性

刘春涛;朱圣韬;田月;张澍田

2012, 33(2):  223-226.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.018

摘要 ( 960 )   PDF (1811KB) ( 301 )  

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目的 检测食管鳞状细胞癌组织及配对癌旁组织中c-Met蛋白的表达情况,探讨c-Met的表达与食管鳞状细胞癌患者临床病理特点的相关性。方法 收集87对甲醛固定,石蜡包埋的食管鳞状细胞癌及配对的癌旁组织标本,所有病例均经病理证实,同时收集患者的临床资料。采用免疫组化的方法检测组织中c-Met的表达情况。结果 c-Met主要表达于细胞膜,表现为胞膜呈棕黄色染色。87例食管鳞癌组织中有29例(33.3%)呈阳性表达。配对癌旁组织中未见c-Met表达。c-Met的表达与食管鳞状细胞癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床病理分期(tumor-node-metastasis,TNM)存在显著相关性(分别为P=0.017,P=0.000,P=0.000),而与患者的性别、年龄、肿瘤细胞分化程度、肿瘤大小等无明显相关性(P>0.05)。结论 c-Met在部分食管鳞癌组织中呈高表达,且与患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期存在显著相关性,c-Met的高表达可以作为高侵袭性食管鳞癌的分子标志物。

变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A的表达、纯化与鉴定

武文琦;丛旭珍;殷爱红;胡家;翟方丽;李慎涛

2012, 33(2):  227-232.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.019

摘要 ( 1029 )   PDF (1687KB) ( 363 )  

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目的 在大肠杆菌中高效表达变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A(ribose 5-phosphate isomerase A,rpiA),并对表达产物进行纯化和鉴定。方法 根据GenBank中变异链球菌UA159株基因组rpiA的DNA编码序列,设计PCR引物,扩增变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A的DNA编码序列,将其克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒,将测序正确的重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷 (isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达;对培养温度、IPTG用量、诱导时间等条件进行了优化;用亲和层析、离子交换层析纯化目标蛋白;用SDS-PAGE和质谱对目标蛋白进行鉴定。结果变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A在大肠杆菌中高效、可溶性表达,经质谱鉴定及SDS-PAGE分析,表达产物为变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A蛋白。经过纯化,得到纯度高达95%的变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A。结论 成功地在大肠杆菌中高效表达了变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A蛋白,并建立了纯化工艺,得到高纯度的重组蛋白,为进一步研究变异链球菌属核糖-5-磷酸异构酶蛋白的生物学活性及功能奠定了基础。

胰岛素防治大鼠一氧化碳中毒迟发性脑病的实验研究

廖秋菊;王晶;秦俭

2012, 33(2):  233-237.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.020

摘要 ( 1129 )   PDF (2071KB) ( 266 )  

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目的 观察胰岛素对一氧化碳(carbon monoxide,CO)中毒后迟发性脑病(delayed neuropsychologic sequelae,DNS)大鼠认知功能及脑神经元凋亡的影响,为临床防治一氧化碳中毒后迟发性脑病提供新的思路。方法 采用大鼠腹腔注射CO气体法制备模型。将中毒后存活的大鼠采用抽签法随机分为CO中毒模型组,CO中毒模型+胰岛素组。胰岛素组给予1.2 mL胰岛素葡萄糖溶液(2 U/Kg胰岛素、2 g/kg葡萄糖)快速腹腔注入,连续给药7d;模型组、对照组腹腔注射等剂量的0.9%氯化钠注射液,连续7 d。采用Morris水迷宫检测各组大鼠1~5周逃避潜伏期,TUNEL法检测各组大鼠5周神经元凋亡情况。结果 腹腔注入CO后,模型组大鼠出现认知功能下降,脑神经细胞凋亡明显;胰岛素组大鼠认知功能改善,脑组织病理损害减轻,细胞凋亡减轻。结论 胰岛素能够改善大鼠认知功能,抑制神经元凋亡,改善存活神经元的细胞形态,对大鼠CO中毒后迟发性脑病具有一定的神经保护作用。

妊娠晚期维生素C干预对大鼠先天性膈疝模型中胎肺的作用

蔡晶晶;陈永卫;张建敏

2012, 33(2):  238-241.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.021

摘要 ( 1341 )   PDF (3184KB) ( 246 )  

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目的 建立大鼠先天性膈疝(congenital diaphragmatic hernia,CDH)模型,检验妊娠晚期维生素C干预对先天性膈疝的发生率以及胎肺发育的作用。方法 妊娠S-D雌鼠12只采用抽签法随机分为4组,对照组(C)、维生素C组(W)、膈疝组(N)及治疗组(T)。N、T组除草醚(nitrofen)灌胃建立胎鼠先天性膈疝模型;孕晚期W、T组维生素C干预。正常孕期前一天(孕21天)剖腹取出胎鼠,记录体质量及肺脏质量;检查胎鼠膈疝的发生率、发生部位、膈肌缺损程度;采用免疫组织化学技术显示ki-67的表达,计算机软件分析计算胎肺组织中增生细胞的比例。结果 膈疝组与治疗组膈疝发生率差异无统计学意义。治疗组胎鼠平均体质量高于另3组,差异有统计学意义。维生素C组及治疗组的平均胎肺质量均高于对照组,对照组高于膈疝组,差异有统计学意义。膈疝组增生细胞比例低于另3组,差异有统计学意义。结论 通过除草醚的应用,成功建立了大鼠的先天性膈疝模型。膈疝组胎鼠的肺脏质量降低,增生细胞比例减少,可能存在肺脏发育不良。维生素C不能明显改变胎鼠先天性膈疝的发生率,但可提高胎鼠肺脏质量,提高增生细胞的比例,促进胎肺发育。

他克莫司对大鼠肾缺血再灌注保护作用的研究

武飞;刘致中

2012, 33(2):  242-245.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.022

摘要 ( 949 )   PDF (2194KB) ( 270 )  

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目的 探讨他克莫司对大鼠肾缺血再灌注的保护作用。方法 选用Wistar雄性大鼠60只,采用抽签法随机分为3组(每组20只):假手术组、对照组、实验组。到达设定的不同灌注时间点取血和肾脏标本,测定血清肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α);检测肾组织B细胞淋巴瘤(B cell lymphoma,Bcl-2)及病理情况。结果 在缺血45 min后再灌注2、6和24 h时,实验组的Cr 、BUN水平显著低于对照组(P＜0.05),而Bcl-2免疫反应强度显著高于对照组(P<0.05)。在再灌注的各时间点,实验组的血清TNF-α含量水平均显著低于对照组(P<0.05)。HE染色光镜下对照组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度重;实验组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度明显减轻;假手术组肾小管及肾小管上皮细胞未见明显改变。结论 他克莫司对大鼠肾缺血再灌注的保护作用可能是通过降低血清TNF-α表达水平和增加肾脏Bcl-2蛋白的表达,从而改善大鼠肾缺血再灌注损伤。

北京市全科医生转岗培训学员状况及培训需求调查

吴涛;黄亚芳;陈锐;谢汝旭;桑盛娟;刘绍杰;叶纯;郭爱民

2012, 33(2):  246-250.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.023

摘要 ( 907 )   PDF (1062KB) ( 344 )  

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目的 了解北京市全科医生转岗培训学员状况、培训需求和影响培训的主要因素。方法 采用问卷调查法和访谈法,对参加北京市第一批全科医生转岗培训的学员进行调查。结果 2010年参加北京市全科医生转岗培训在训学员共86人,发出问卷86份,回收80份,回收率为93.0%。城区、近郊区转岗培训学员学历和职称高于远郊区学员,注册全科医学范围人数仅占1.3%,最需要培训的技能为诊断与鉴别诊断,最需要培训的知识为常见病多发病的诊治。结论 应进一步完善培训大纲,合理安排培训时间,结合全科医生工作特点开展培训。

高同型半胱氨酸血症对平滑肌细胞的氧化损伤

李燕;张春来;卢峰;王立忠;姜玉凤

2012, 33(2):  251-254.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.024

摘要 ( 979 )   PDF (1013KB) ( 396 )  

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目的 观察同型半胱氨酸血症对兔颈动脉平滑肌细胞氧化损伤,进而从细胞及分子水平探讨同型半胱氨酸血症对活体动物平滑肌细胞的氧化损伤的发病机制。方法 以高蛋氨酸饮食饲喂新西兰大白兔,3个月后分离颈动脉,分离得到的兔颈动脉平滑肌用胰蛋白酶消化处理,取消化后的细胞进行培养。采用黄嘌呤氧化比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活力。用可见光比色法测定细胞内过氧化氢(catalase,CAT)的活力。结果 在高蛋氨酸饮食作用下,兔颈动脉平滑肌细胞内CAT、SOD 的含量明显增高,与2%的蛋氨酸低饲喂浓度及对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论同型半胱氨酸血症可加速动脉血管壁平滑肌细胞的增生,并可能在一定剂量范围内造成动脉血管壁平滑肌细胞的氧化损伤加重,使机体动脉粥样硬化的进程加速。

临床研究

急性脑梗死患者血清淀粉样蛋白A的临床和预后价值

吴修信;李立新;廖品君;苑媛

2012, 33(2):  255-258.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.025

摘要 ( 1033 )   PDF (1102KB) ( 340 )  

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目的 探讨急性脑梗死患者血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)的临床和预后价值。方法 选取广东省惠州市第三人民医院神经内科2009年10月1日至2010年10月1日收治的100例急性脑梗死患者,收集其静脉血样本作为病例组,酶联免疫吸附法测定患者治疗前和治疗21 d时SAA浓度,放射免疫比浊法测定C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)浓度;选择50例正常体检者作为对照组。予患者综合治疗,并在入院及治疗21 d时进行美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS) 评分,判断其神经功能缺损情况,利用Pearson相关系数对SAA浓度与NIHSS评分进行分析,探究SAA在急性脑梗死患者中的临床和预后价值。结果 病例组治疗前SAA浓度为(18.05±6.77)mg/L,明显高于治疗后(7.81±2.66)mg/L及对照组(7.49±4.49)mg/L(P均<0.05);病例组治疗前CRP浓度为(15.08±4.32)mg/L,明显高于治疗后(6.05±2.20)mg/L及对照组(5.5±3.34)mg/L(P均<0.05)。21 d时病例组NIHSS评分比入院时明显下降(11.07±4.2 vs 7.78±2.89,P<0.05)。急性脑梗死患者急性期SAA浓度,而非CRP浓度,与NIHSS 评分差值呈正相关(r=0.612,P<0.05)。结论 急性脑梗死患者血清SAA、CRP浓度均明显升高,可作为判断病情活动的重要指标,急性期SAA浓度与治疗前后NIHSS 差值显著相关,提示SAA可作为判断急性脑梗死患者的预后的指标。

丘脑神经节胶质细胞瘤6例并文献复习

耿素民;张力伟;郝淑煜;吴震;贾桂军;张俊廷

2012, 33(2):  259-262.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.026

摘要 ( 1196 )   PDF (2923KB) ( 278 )  

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目的 探讨丘脑神经节胶质细胞瘤(ganglioglioma,GG)的临床特点、治疗和预后。方法 对6例经手术和病理证实的丘脑神经节胶质细胞瘤患者的临床资料进行回顾性分析并复习文献。结果 丘脑神经节胶质细胞瘤主要临床表现为颅内压增高和偏身运动感觉障碍,患者平均发病年龄12.5岁。6例肿瘤镜下全切除2例,近全切除3例,大部切除1例。术后3例出现对侧肢体偏身运动感觉障碍加重。6例患者平均随访29个月,2例恢复正常工作,3例生活可自理,1例间变性神经节胶质细胞瘤患者复发后死亡。结论 丘脑神经节胶质细胞瘤由于缺乏特异的临床症状和神经影像学表现,术前诊断困难,明确诊断需要组织病理学检查。手术治疗是主要的治疗方法,间变性神经节胶质细胞瘤预后差,术后应长期严密随访。

妊娠期糖尿病孕妇产后糖代谢异常的影响因素

周莉;吴连方;范玲;李晓玉

2012, 33(2):  263-267.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.027

摘要 ( 1017 )   PDF (1014KB) ( 552 )  

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目的 探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者产后糖代谢转归情况及产后糖代谢异常的相关因素。方法 收集并分析2008年1月至2010年12月在北京妇产医院进行产前检查、分娩及产后随访的624例妊娠期糖尿病孕妇的临床资料,根据产后6~8周糖代谢恢复情况分为糖代谢正常组(444例)和糖代谢异常组(180例),了解两组转归的相关因素。结果 1)444例孕妇产后6~8周糖代谢恢复正常,占71.2%,180例孕妇产后6~8周糖代谢仍然异常,占28.8%,其中糖尿病(diabetes mellitus,DM)18例,空腹血糖受损(impaired fasting glucose,IFG)32例,糖耐量受损(impaired glucose tolerance,IGT)130例;2)产后糖代谢异常组孕期GDM诊断的孕周较糖代谢正常组早,空腹血糖、孕前及产后体质量指数(body mass index,BMI)、血脂均较正常组高,孕期应用胰岛素控制血糖、合并相关合并症、DM家族史的比例较正常组高,差异有统计学意义(P<0.05),而两组母乳喂养比例差异无统计学意义(P>0.05);3)两组孕妇的年龄、孕产次以及孕期体质量增长相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 1)大部分GDM孕妇产后6~8周糖代谢可恢复正常, 28.8%(180例)的孕妇产后仍然存在糖代谢异常;2)孕妇GDM诊断孕周早、孕期空腹血糖高、DM家族史、孕期应用胰岛素控制血糖、孕期合并相关合并症、孕前及产后高BMI、高脂血症等均为产后糖代谢异常的高危因素。

技术方法

一种灵长类动物帕金森病模型行为检测方法

刘玉军;鲁强;陈庆友;张进禄

2012, 33(2):  268-270.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.028

摘要 ( 622 )   PDF (1435KB) ( 368 )  

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帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是以中脑黑质多巴胺能神经元变性缺失为主要病理特征的一种神经退行性疾病,临床表现主要有静止性震颤、肌强直、运动减少和姿势反射障碍等^[1-2]。PD多在40岁以后发病,随着老龄化日益加重,其发病率呈现出明显上升趋势^[3-5]。研究显示PD发展过程中的行为改变表现出慢性进展的特点,这与多巴胺能神经元发生慢性进行性退变有关^[1-7]。目前,有关PD模型实验大部分来自于啮齿类低等动物模型,缺乏高等灵长类动物试验^[5-8],其原因是对高等灵长类动物PD模型行为学变化缺乏客观有效的评价方法^[9-10]。Gash D M等^[10]利用计算机模-数转换技术开发出猴运动检测平台(monkey motor assessment panel 2000,mMAP2000),此方法可以定量检测及分析人及灵长类动物上肢运动行为,研究结果显示随着年龄的增长上肢运动的精确性降低。本课题组将上述技术应用于灵长类(恒河猴)PD动物模型行为学定量检测,发现本方法受观察者主观意见干扰小,是一种科学准确的行为学定量方法。现将本方法实验过程简述如下,以供借鉴。

短篇

电喷雾电离四极杆质谱直接进样定性检测化合物实验条件的研究

赵逸松;宋学英;薛冰

2012, 33(2):  271-274.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.029

摘要 ( 642 )   PDF (1046KB) ( 954 )  

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质谱分析具有灵敏度高、样品用量少、分析速度快等优点^[1]。对于表征有机化合物而言,第一步和最重要的步骤就是快速准确地确定相对分子质量,电喷雾电离四极杆质谱恰好满足了这样的要求,成为药物化学合成实验不可缺少的检测工具之一。本文中用到的质谱是Waters公司的型号为Quattro micro^TM API的电喷雾电离四极杆质谱,它的可测质荷比范围为2~2 000 m/z,适用于小分子化合物检测,所以可用于药物化学实验反应中间产物、目标化合物以及副产物的定性检测。

综述

银屑病样模型的研究进展

底婷婷;赵京霞;李萍

2012, 33(2):  275-279.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.030

摘要 ( 1059 )   PDF (1015KB) ( 1905 )  

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在研究人类银屑病复杂表型与发病机制的过程中,由于缺乏自然发生的可模拟银屑病的疾病模型,该研究曾一度停滞。但随着对银屑病发病机制认识的不断深入,现已模拟出多种在组织水平、细胞水平以及分子水平与银屑病较为相似的模型。本文通过对多种银屑病相关模型的总结与评价,分析各模型的优势与局限,为银屑病发病机制、药物筛选及治疗提供参考。

肿瘤干细胞在子宫内膜癌的诊断与治疗中的研究进展

崔开宇;孔宪超

2012, 33(2):  280-283.  doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2012.02.031

摘要 ( 1273 )   PDF (1004KB) ( 824 )  

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肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)由于其具有自我更新、高分化潜能、高致瘤性等特性,目前,在血液肿瘤、乳腺癌、脑肿瘤及前列腺癌等疾病的研究中取得了一定的进展。但是,各种CSC的鉴定与分离都还处在探索阶段。本文复习了子宫内膜癌、肿瘤干细胞及子宫内膜干细胞的概况,对肿瘤干细胞在子宫内膜癌的诊断与治疗方面的应用进展进行了综合阐述,并对其未来研究前景进行了讨论与展望。

名师

在外科技术中彰显人文关怀的领航者——记首都医科大学宣武医院孙家邦教授

2012, 33(2):  284-285. 

摘要 ( 536 )   PDF (1218KB) ( 272 )  

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孙家邦, 男, 教授, 主任医师, 博士生导师。1936年12月生, 辽宁人。1960年毕业于北京医学院医疗系, 原中华医学会外科学分会常委, 胰腺学组副组长, 北京市医疗事故鉴定委员会外科系统副组长, 现为中华医学会咨询专家委员会专家, 中华医学会胰腺学组顾问, 劳动及社会保障部药审专家和制定劳动能力鉴定标准专家, 中央保健会诊专家。任《中华外科杂志》、《中华肝胆外科杂志》、《中国实用外科杂志》、《中国营养》等10余家期刊的编委、资深编委或顾问。1991年获国务院特殊津贴。50余年来一直从事腹部外科的临床与科研工作, 并积累了丰富的经验, 尤其在胰腺癌和重症胰腺炎的诊断与治疗方面有着深入的研究。其中胰腺癌的诊断与治疗、经皮经肝胆道穿刺引流术、梗阻性黄疸的基础研究、直肠癌的外科治疗以及重症胰腺炎的诊断与治疗等, 多次获北京市、局科技成果奖。在北方最早成立了普通外科监护病房、腹腔镜专业组, 建立了设备及技术手段较为齐备的普通外科实验室, 使宣武医院普通外科的临床和科研能力始终保持在较高的水平。曾参加编写《临床外科学》、《胰腺外科》、《腹腔镜外科》、《外科常见疾病》等著作十余部。发表学术论文170多篇。获国家自然科学基金二等奖1项, 北京市科技进步三等奖2项, 局级一~三等奖6项。